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xiesenyuli

金虫 (小有名气)

[求助] OD600需要即取即测吗?

测量生物量时,需要取完立即测吗,还是可以放冰箱里,等所有的取完再一起测?一般大家测的时候是不是直接从培养液里取几毫升就直接测了,不需要离心什么的?是不是测这个都需要熬夜?因为一般时间超过24h了。对微生物不太懂,又要做这方面,只能请教一下大家了。谢谢啦
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mingzhu392

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
zhang8826857(金币+3): good,很热心,很积极的回帖,lz可以参考下 2011-10-10 13:21:39
测生长曲线的话这是我测生长曲线的方法仅供参考:将菌株接种至MRS液体培养基中活化48h,再以5%的接种量接种于装有400mLMRS液体培养基的三角瓶中,混合均匀后分别取10mL混合液放入40支无菌试管中,28℃培养,分别培养0、2、4、8、10、12、14、16、18、20、22、24、36、38、40、42、44、48测定600nm处的吸光度,用不接菌的空白培养基做对照管。以培养时间为横坐标,相应吸光度为纵坐标,绘制生长曲线。
5楼2011-10-10 08:52:23
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普通回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
scelab(金币+4, MicEPI+1): 热心滴娃,奖励奖励,hoho~~~ 2011-10-09 22:43:55
xiesenyuli(金币+1): 谢谢您,你对这方便很懂,以后有问题可以请教你吗?qq383928170 2011-10-10 07:46:06
1、是的,你在超净台里面取出来就侧呗,反正很快就出来了,测完了接着摇菌……
2、不用几毫升,200ul足够了,有个eppendorf的小仪器很好用的……
3、坚决不要离心,你离心再重悬会有很大的损失,直接用没接菌的培养基做空白对照标零即可
4,你是要测生长曲线?那样的话的确需要熬夜了……得看你具体是要干嘛了
显微镜下的世界很精彩!
2楼2011-10-09 22:18:12
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jylichn

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我对od600不太感冒,感觉不太靠谱
培养基的颜色怎么算?楼上的用新鲜培养基来清零,那结果只能是大概加估计了。如果离心一份发酵液,上清用来清零,又太麻烦了
3楼2011-10-09 23:02:29
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


zhang8826857(金币+1): 回帖很积极,鼓励一下 2011-10-10 13:21:02
引用回帖:
3楼: Originally posted by jylichn at 2011-10-09 23:02:29:
我对od600不太感冒,感觉不太靠谱
培养基的颜色怎么算?楼上的用新鲜培养基来清零,那结果只能是大概加估计了。如果离心一份发酵液,上清用来清零,又太麻烦了

既然用OD600来测生物量,那肯定是测细菌的了,你也说了OD600不大靠谱,既然lz打算用OD600测的话那就提供OD600的方法,当然你要离心称湿(干)重这个更精确……况且OD600的生物量本身就是提供一个趋势,发酵液摇的菌最好别产色素,那我也不知道咋测了
显微镜下的世界很精彩!
4楼2011-10-09 23:06:56
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lifeng

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by asznpb at 2011-10-09 22:18:12:
1、是的,你在超净台里面取出来就侧呗,反正很快就出来了,测完了接着摇菌……
2、不用几毫升,200ul足够了,有个eppendorf的小仪器很好用的……
3、坚决不要离心,你离心再重悬会有很大的损失,直接用没接菌的 ...

可以直接用去离子水做空白对照吗?不用没有接菌的培养液
6楼2011-10-10 20:27:14
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asznpb

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lifeng at 2011-10-10 20:27:14:
可以直接用去离子水做空白对照吗?不用没有接菌的培养液

不行,培养基本身也有吸光值的
显微镜下的世界很精彩!
7楼2011-10-10 20:58:08
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loganfan

银虫 (正式写手)

你把它放在那,它还会长,所以必须马上震荡后测
8楼2011-10-14 20:42:44
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣

即取即测
dasheng1980
9楼2011-10-17 14:07:15
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bohr86

木虫 (正式写手)

取样就可以测了,我是那样做的,但效果似乎不是很好~
10楼2011-10-17 14:11:23
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