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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » OD600需要即取即测吗？
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xiesenyuli

金虫 (小有名气)

[求助] OD600需要即取即测吗？

测量生物量时，需要取完立即测吗，还是可以放冰箱里，等所有的取完再一起测？一般大家测的时候是不是直接从培养液里取几毫升就直接测了，不需要离心什么的？是不是测这个都需要熬夜？因为一般时间超过24h了。对微生物不太懂，又要做这方面，只能请教一下大家了。谢谢啦
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1楼 2011-10-09 22:10:55
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

mingzhu392

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
zhang8826857(金币+3): good，很热心，很积极的回帖，lz可以参考下 2011-10-10 13:21:39
测生长曲线的话这是我测生长曲线的方法仅供参考：将菌株接种至MRS液体培养基中活化48h，再以5%的接种量接种于装有400mLMRS液体培养基的三角瓶中，混合均匀后分别取10mL混合液放入40支无菌试管中，28℃培养，分别培养0、2、4、8、10、12、14、16、18、20、22、24、36、38、40、42、44、48测定600nm处的吸光度，用不接菌的空白培养基做对照管。以培养时间为横坐标，相应吸光度为纵坐标，绘制生长曲线。
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5楼2011-10-10 08:52:23
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普通回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
scelab(金币+4, MicEPI+1): 热心滴娃，奖励奖励，hoho~~~ 2011-10-09 22:43:55
xiesenyuli(金币+1): 谢谢您，你对这方便很懂，以后有问题可以请教你吗？qq383928170 2011-10-10 07:46:06
1、是的，你在超净台里面取出来就侧呗，反正很快就出来了，测完了接着摇菌……
2、不用几毫升，200ul足够了，有个eppendorf的小仪器很好用的……
3、坚决不要离心，你离心再重悬会有很大的损失，直接用没接菌的培养基做空白对照标零即可
4,你是要测生长曲线？那样的话的确需要熬夜了……得看你具体是要干嘛了
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2楼2011-10-09 22:18:12
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jylichn

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我对od600不太感冒，感觉不太靠谱
培养基的颜色怎么算？楼上的用新鲜培养基来清零，那结果只能是大概加估计了。如果离心一份发酵液，上清用来清零，又太麻烦了
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3楼2011-10-09 23:02:29
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 回帖很积极，鼓励一下 2011-10-10 13:21:02
引用回帖:
3楼: Originally posted by jylichn at 2011-10-09 23:02:29:
我对od600不太感冒，感觉不太靠谱
培养基的颜色怎么算？楼上的用新鲜培养基来清零，那结果只能是大概加估计了。如果离心一份发酵液，上清用来清零，又太麻烦了

既然用OD600来测生物量，那肯定是测细菌的了，你也说了OD600不大靠谱，既然lz打算用OD600测的话那就提供OD600的方法，当然你要离心称湿（干）重这个更精确……况且OD600的生物量本身就是提供一个趋势，发酵液摇的菌最好别产色素，那我也不知道咋测了
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4楼2011-10-09 23:06:56
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lifeng

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by asznpb at 2011-10-09 22:18:12:
1、是的，你在超净台里面取出来就侧呗，反正很快就出来了，测完了接着摇菌……
2、不用几毫升，200ul足够了，有个eppendorf的小仪器很好用的……
3、坚决不要离心，你离心再重悬会有很大的损失，直接用没接菌的 ...

可以直接用去离子水做空白对照吗？不用没有接菌的培养液
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6楼2011-10-10 20:27:14
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asznpb

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lifeng at 2011-10-10 20:27:14:
可以直接用去离子水做空白对照吗？不用没有接菌的培养液

不行，培养基本身也有吸光值的
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7楼2011-10-10 20:58:08
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loganfan

银虫 (正式写手)
你把它放在那，它还会长，所以必须马上震荡后测
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8楼2011-10-14 20:42:44
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣
即取即测
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dasheng1980
9楼2011-10-17 14:07:15
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bohr86

木虫 (正式写手)
取样就可以测了，我是那样做的，但效果似乎不是很好～
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10楼2011-10-17 14:11:23
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