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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌液OD600如何测定
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weining1203

新虫 (小有名气)

[求助] 菌液OD600如何测定

最近做大肠杆菌原核表达，摇菌2-3小时候，要用紫外分光光度计测OD600，以液体LB培养基做空白对照，那么菌液还要稀释后再测还是直接吸取一定体积菌液直接测其OD啊？本人小白 求指点
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1楼 2012-11-08 17:59:28
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by 仁者图图 at 2012-11-09 00:05:58
是要一定要两个到三个小时么？一般不是先控制OD值再用它来提酶么？呵呵，我也是新手啦~有点疑问而已，可以忽视我说的...

摇2-3h是经验值。过夜的菌液浓度太高，生长状态也不好，所以要取少量接种到新的培养液里使OD达到一定值。此时菌的活性高，适宜做诱导表达。
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5楼2012-11-09 08:08:28
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普通回帖

电电的开始

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
weining1203: 金币+1, ★有帮助 2012-11-09 20:24:09
先做未稀释的试试，要是OD超过1就要稀释了！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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为自己而开始
2楼2012-11-08 20:30:04
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weining1203

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 电电的开始 at 2012-11-08 20:30:04
先做未稀释的试试，要是OD超过1就要稀释了！

如果稀释后，那么原液的OD值是按稀释倍数计算吗
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3楼2012-11-08 21:31:09
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仁者图图

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是要一定要两个到三个小时么？一般不是先控制OD值再用它来提酶么？呵呵，我也是新手啦~有点疑问而已，可以忽视我说的...
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4楼2012-11-09 00:05:58
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

要看你的目标OD是多少，一般摇2-3小时的菌液OD未超过1，直接测就可以了。
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6楼2012-11-09 08:09:39
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448935271

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我之前测大肠杆菌都是稀释10倍测的，一般OD值在0.3-0.7之间值比较准确
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万物皆有毒，只要剂量足
7楼2012-11-09 09:44:34
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tiangeyifang

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
OD值不超过1就没必要稀释了
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8楼2012-11-09 09:54:16
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我都是直接测的……不稀释，大概2-3小时就可以长到0D600=0.5~0.6了.
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Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
9楼2012-11-09 11:03:20
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wangwenxia16

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
OD600控制在0.2~0.4之间比较准，可以稀释几个梯度看看，如果稀释2倍后OD为0.35，那么你菌液的OD应该是0.35X2=0.7
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10楼2012-11-09 12:31:43
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