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weining1203

新虫 (小有名气)

[求助] 菌液OD600如何测定

最近做大肠杆菌原核表达,摇菌2-3小时候,要用紫外分光光度计测OD600,以液体LB培养基做空白对照,那么菌液还要稀释后再测还是直接吸取一定体积菌液直接测其OD啊?本人小白 求指点
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

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引用回帖:
4楼: Originally posted by 仁者图图 at 2012-11-09 00:05:58
是要一定要两个到三个小时么?一般不是先控制OD值再用它来提酶么?呵呵,我也是新手啦~有点疑问而已,可以忽视我说的...

摇2-3h是经验值。过夜的菌液浓度太高,生长状态也不好,所以要取少量接种到新的培养液里使OD达到一定值。此时菌的活性高,适宜做诱导表达。
5楼2012-11-09 08:08:28
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普通回帖

电电的开始

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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weining1203: 金币+1, 有帮助 2012-11-09 20:24:09
先做未稀释的试试,要是OD超过1就要稀释了!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
为自己而开始
2楼2012-11-08 20:30:04
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weining1203

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 电电的开始 at 2012-11-08 20:30:04
先做未稀释的试试,要是OD超过1就要稀释了!

如果稀释后,那么原液的OD值是按稀释倍数计算吗
3楼2012-11-08 21:31:09
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仁者图图

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是要一定要两个到三个小时么?一般不是先控制OD值再用它来提酶么?呵呵,我也是新手啦~有点疑问而已,可以忽视我说的...
4楼2012-11-09 00:05:58
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

要看你的目标OD是多少,一般摇2-3小时的菌液OD未超过1,直接测就可以了。
6楼2012-11-09 08:09:39
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448935271

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我之前测大肠杆菌都是稀释10倍测的,一般OD值在0.3-0.7之间值比较准确
万物皆有毒,只要剂量足
7楼2012-11-09 09:44:34
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tiangeyifang

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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OD值不超过1就没必要稀释了
8楼2012-11-09 09:54:16
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我都是直接测的……不稀释,大概2-3小时就可以长到0D600=0.5~0.6了.
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
9楼2012-11-09 11:03:20
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wangwenxia16

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
OD600控制在0.2~0.4之间比较准,可以稀释几个梯度看看,如果稀释2倍后OD为0.35,那么你菌液的OD应该是0.35X2=0.7
10楼2012-11-09 12:31:43
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