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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 混有粉末杂质的菌液，如何测定OD600
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夏初晴Elsa

新虫 (初入文坛)

[求助] 混有粉末杂质的菌液，如何测定OD600 已有3人参与

求助：本人非生物学专业学生在做细菌实验，关于测OD600，有问题求助一下各位大神：

由于液体培养基中混有二氧化锰和赤铁矿两种粉末，影响了OD600的测定，请问有什么方法可以排除影响呢？
离心可以吗，转速多少呢？
之前尝试过静置，但是由于不同的菌沉淀效果不一样，粉末依然存在影响，所以静置感觉不可行。且静置后菌体也会沉淀吧？
还有其他专业的方法吗？

非常感谢！
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1楼 2015-07-21 17:46:15
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3306549

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
静置取上部，或者做个空白管
实在不行倒板子吧
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2楼2015-07-22 10:29:07
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小花木兰

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知你液体培养基为什么会混入二氧化锰和赤铁矿两种粉末，是必须添加进去吗，若不是，为什么不配个液体培养呢，
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3楼2015-07-22 14:43:09
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夏初晴Elsa

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小花木兰 at 2015-07-22 14:43:09
不知你液体培养基为什么会混入二氧化锰和赤铁矿两种粉末，是必须添加进去吗，若不是，为什么不配个液体培养呢，

对，是必须添加进去的，培养异化金属还原菌需要的
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4楼2015-07-22 19:22:50
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夏初晴Elsa

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 3306549 at 2015-07-22 10:29:07
静置取上部，或者做个空白管
实在不行倒板子吧

之前尝试做过空白，但是静止同样时间后，几种菌液中那两种粉末沉淀程度不一样，粉末对吸光度有影响，所以不能准确表征OD600
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5楼2015-07-22 19:24:43
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ccdbaobao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
请问你测OD600的目的是什么，若只是计数菌浓度的话可以改成平板计数，这样会准确一些。若是要测定生长曲线的话，可以用含有两种粉末的原始培养基做为对照。
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6楼2015-07-23 15:20:54
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夏初晴Elsa

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ccdbaobao at 2015-07-23 15:20:54
请问你测OD600的目的是什么，若只是计数菌浓度的话可以改成平板计数，这样会准确一些。若是要测定生长曲线的话，可以用含有两种粉末的原始培养基做为对照。

测OD600就是表征菌浓度，并且测生长曲线。
平板计数怎么做呢？
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7楼2015-07-23 17:33:22
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ccdbaobao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 夏初晴Elsa at 2015-07-23 17:33:22
测OD600就是表征菌浓度，并且测生长曲线。
平板计数怎么做呢？...

平板计数就是将你的菌液做梯度稀释，从10-1--10-7或者更高，然后平板涂布，计数长出来的菌落数，以30-300为好，最后乘以你稀释的倍数就是原菌液的浓度了。
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8楼2015-07-24 08:44:17
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华农沙漠胡杨

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 夏初晴Elsa at 2015-07-23 17:33:22
测OD600就是表征菌浓度，并且测生长曲线。
平板计数怎么做呢？...

不知道你菌的大小是多少？楼主可以用大口径的滤器过滤下即可？很简单的，还不损失细菌。
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9楼2015-07-24 09:14:18
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