应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 外源片段比载体大，构建时很诡异
51/1返回列表
查看: 1459  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tu475575025

新虫 (小有名气)

[求助] 外源片段比载体大，构建时很诡异 已有5人参与

载体只有3k,我要连的片段有3.6k，用双酶切（一个粘性，个平端），第一次转化后一个子也没有长，想请教这种情况在连接时是否需要将载体骨架和片段的比例调整到片段比载体骨架多？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-04-11 11:26:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biostar2009

专家顾问 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by tu475575025 at 2014-04-11 14:39:48
第一次连的时候以为很容易，就没想这个问题，片段比例太大，今天在重做，感谢建议~~~~~...

这种载体酶切脱磷什么的要最好一点。
赞一下 回复此楼
9楼2014-04-11 14:42:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-11 14:36:39
外源肯定要比载体多，你用了个平末端的位点，这个是不长的原因

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-04-11 11:46:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tu475575025

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-11 11:46:55
外源肯定要比载体多，你用了个平末端的位点，这个是不长的原因

我已经用一个粘端加一个平端成功构过几个载体了，只是这次骨架较小，片段太大，不知道加大T4酶量或者用soulution I 效果是不是好点
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-11 12:41:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tu475575025

新虫 (小有名气)
有做过小骨架连大片段的经验吗，来取点经
赞一下 回复此楼
4楼2014-04-11 12:42:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭