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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 封闭液 和 显色
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

[求助] 封闭液 和 显色 已有3人参与

western blot  一抗结合的 是 牛乳中 酪蛋白，，请问  封闭液 还能用  含 脱脂奶粉 的 TBST 吗？？

二抗用 辣根过氧化酶 标记   --- 显色底物 使用  TMB   能够自己配制吗？  应该需要怎么配制 呢   
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12
1楼 2014-04-01 17:22:21
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d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+1, 谢谢参与，答非所问了 2014-04-02 15:20:20
永峰1230: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-04-09 21:06:11
你的封闭液我也不确定是否要加脱脂奶粉。
显色液的话是要买的，我之前用的是“Millipore Western Blot 化学发光HRP底物 ECL发光液”，你在网上搜一下。
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2楼2014-04-02 13:45:27
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weskerZXC

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
永峰1230: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-04-09 21:06:21
个人看过abcam的实验protocol，貌似最好用BSA
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3楼2014-04-09 13:38:23
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
永峰1230: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-04-11 09:57:05
不能用脱脂奶，不知道BSA行不行
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4楼2014-04-11 09:52:15
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-04-11 09:52:15
不能用脱脂奶，不知道BSA行不行

谢谢
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12
5楼2014-04-11 09:56:55
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by weskerZXC at 2014-04-09 13:38:23
个人看过abcam的实验protocol，貌似最好用BSA

请问，BSA 是牛血清蛋白吗？      浓度 需要多少呢
谢谢
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12
6楼2014-04-12 13:08:33
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weskerZXC

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 永峰1230 at 2014-04-12 13:08:33
请问，BSA 是牛血清蛋白吗？      浓度 需要多少呢
谢谢...

5%BSA封闭，质量体积比，BSA就是牛血清白蛋白
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7楼2014-04-13 08:52:35
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LZLLZLLZL

木虫 (小有名气)
我们封闭就用的5%牛奶的TBST,时间为一小时。
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8楼2014-04-22 19:30:22
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by LZLLZLLZL at 2014-04-22 19:30:22
我们封闭就用的5%牛奶的TBST,时间为一小时。

谢谢，，可是我的一抗结合的是酪蛋白。

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12
9楼2014-04-22 23:48:26
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