| 查看: 6541 | 回复: 9 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[求助]
可以往一个细胞内转染两次吗 已有1人参与
|
||||
| 不知道可 不可以先转进一个基因让细胞过表达，然而再转siRNA干扰另一个蛋白，可不可以，如果可以，是同时转进去还是第一个质粒转进去后多少个小时再转干扰RNA? |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有213人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有3人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- FAM-miRNA转染小鼠骨髓间充质干细胞观察不到荧光
已经有7人回复
- 干细胞用什么转染比较好？
已经有8人回复
- 悬浮细胞的转染
已经有7人回复
- 细胞瞬时转染和质粒复制
已经有23人回复
- 关于基因转染中DNA在细胞内的释放！
已经有6人回复
- 转染后细胞污染
已经有21人回复
- 细胞转染，有许多孔的细胞死了，什么原因？
已经有9人回复
- 细胞稳定转染，质粒的设计
已经有15人回复
- 急求助细胞转染问题
已经有2人回复
- 细胞转染问题 加急
已经有1人回复
- 【求助/交流】细胞系转染的时间探讨
已经有7人回复
- 【求助/交流】求助：Western检测转染质粒在细胞内的表达
已经有4人回复
- 【求助/交流】农杆菌瞬时转染植物悬浮细胞后能除掉吗？回帖就送币！
已经有18人回复
- 【求助/交流】请问转染了GFP的肿瘤细胞？
已经有8人回复
- 【求助/交流】求助：心肌细胞脂质体转染的经验
已经有3人回复
6楼2014-04-04 21:09:05
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10399.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
2楼2014-03-31 11:58:30
3楼2014-04-02 22:22:49
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10399.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-04-03 19:23:48
nanshi304: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-04-04 21:04:58
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-04-03 19:23:48
nanshi304: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-04-04 21:04:58
|
各种纠结。。。 转质粒一般默认48h，转siRNA一般默认72h 这里考虑的更多的并不是质粒DNA和siRNA的稳定性，这两个玩意稳定着呢，一周没问题。 考虑的是最大效率化，lippo转质粒，细胞密度要求90%，转siRNA，细胞密度低一点，所以这么长时间是一盘细胞的生长极限。你再养，细胞死了。 你要两次转染，转染肯定有细胞毒性，耐受性不好的细胞可能转一次就活得不咋地了，这个是你需要提前优化的。 这只是默认，尤其是siRNA。 经常看见有报道，按照默认的72h检测siRNA效果，结果发现定了一堆siRNA，效果都不好，最后发现原来是48h或者24h效果最好，原因不明。 所以如果你的这条siRNA没有做过预实验，先不要搞这么复杂的 转几个小dish，收一个时间梯度，看看什么时候效果最好。 把这些预实验条件先摸好了，再来转两次。 |
4楼2014-04-03 09:25:13
5