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zhenguo86

木虫 (著名写手)

[求助] 色谱柱压力问题 已有5人参与

各位大侠,  
       我现在用的是WatersSpherisorb ODS-2(PSS832113),C18(4.6×150mm,3um),流动相为乙腈-pH3.2磷酸二氢钠-乙醇=34-66-2,流速1.5
一开始磷酸二氢钠用的是天津的,柱压一天比一天高,后来换用国药试剂,基本不会升高。用一个月后柱压从15MPa升至18.5MPa,柱效下降。经用5%乙腈-水和5%   异丙  醇、异丙醇、甲醇冲洗后,柱压升至20MPa。(乙腈用国药乙腈)
       有什么好办法可以让我的色谱柱恢复,或好的建议针对此类型的色谱柱使用应注意些什么!!
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maxmahao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhenguo86: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-03-26 20:42:38
不知道你的磷酸二氢钠用的是多少mm的?
这样看的话很有可能是盐的沉积,冲洗步骤这么多,压力反而上升的话,你用高比例水相冲洗时间持续时间是?
可能是部分盐分沉积了,建议先用高比例水相小流速来冲较长时间
再不行的话就小流速反冲之
2楼2014-03-26 11:12:06
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suruiqin

版主 (知名作家)

我觉得可能是流速太高,柱头下陷的缘故,最好在不进样时别把流速调太高,还有就是你充柱子的时候把柱子倒过来冲一下试试,我的也是,我倒过来冲了一下,感觉好点,上述谨代表本人看法
所有的成就都源于新的挑战
3楼2014-03-26 11:32:34
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fagui168

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
其实楼主根本不需要在这里询问什么方法,直接在你柱子的使用说明书上找答案就行了。那上面应该完整给出了柱子遇到类似情况该如何处理的。那是最官方,是根据你柱子量身定制的处理方法。
改变你不能改变的,适应你不能适应的
4楼2014-03-26 11:45:05
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进样瓶洗涤器

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhenguo86: 金币+1, 有帮助 2014-03-26 20:43:24
这么低的pH,盐的浓度应该不低,用之前过滤应该好点吧。
5楼2014-03-26 11:57:38
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zhenguo86

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by maxmahao at 2014-03-26 11:12:06
不知道你的磷酸二氢钠用的是多少mm的?
这样看的话很有可能是盐的沉积,冲洗步骤这么多,压力反而上升的话,你用高比例水相冲洗时间持续时间是?
可能是部分盐分沉积了,建议先用高比例水相小流速来冲较长时间
再 ...

磷酸二氢钠是2.77g无水磷酸二氢钠+0.25g磷酸制备的pH3.2的磷酸缓冲液;用5%的乙腈,水的比例应该不低了吧,0.5或1ml/min的流速冲洗一个小时以上。
6楼2014-03-26 12:50:20
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月光晒谷

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你确定是流动想的问题吗,不是样品的原因引起吗?看你的描述,应该是堵了,很有可能是筛板。你可以找相同型号的色谱柱(完全相同),把筛板换上(也可能无法换),并看看入口填料是不是变颜色了,如果这样换筛板可能也解决不聊了。也可以把筛板自己洗一下,好香30%的硝酸即可。实在不行,找专业人员重装。看你的情况,不是冲洗就能解决的了。
7楼2014-03-29 23:12:08
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yangxp2006

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

首先应该判断是柱压过高还是仪器的压力,走纯甲醇,流速1.0ml/min,卸掉柱子,管路出口朝上,看流动相出来是否成喷雾状,以及仪器压力情况,若是成水滴状,以及压力很高,就可以考虑把在线过滤器拆下来清洗。正常情况下仪器压力在100psi左右
若正常,则可能是柱子堵了,首先用20%乙腈水溶液过夜低流速冲洗,看是否能解决问题。若不行,则考虑把柱子的筛板卸下清洗。还不行,就换柱子吧
8楼2014-03-30 09:50:54
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yangxp2006

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by yangxp2006 at 2014-03-30 09:50:54
首先应该判断是柱压过高还是仪器的压力,走纯甲醇,流速1.0ml/min,卸掉柱子,管路出口朝上,看流动相出来是否成喷雾状,以及仪器压力情况,若是成水滴状,以及压力很高,就可以考虑把在线过滤器拆下来清洗。正常情 ...

经常使用缓冲盐,仪器在线过滤器很容易有盐析出。并且我一般很少用钠盐,钾盐的溶解度一般会高一些。
9楼2014-03-30 09:52:39
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