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704579825金虫 (初入文坛)
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[求助]
蛋白转膜N端测序
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各位战友： 我近来在做蛋白转膜，用于N端测序，但是蛋白一直没有转到膜上，预染marker转的很好！ 我的蛋白分子量约12kDa，用恒流跑，电流I=0.65*S ，其中S为胶的面积，我跑的是Tricine-SDS-PAGE。 我试过转膜时间30min，60min，90min，120min，但考染后都没有看见条带，我的时间设置有问题吗？ 另外，我在蛋白跑Tricine-SDS-PAGE前，没有煮沸，想问这对转膜有影响吗？N端测序，蛋白可以煮沸后跑胶吗？ 谢谢各位了！这东西弄得太烦了呀  ，又是毕业季，晕！ |
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