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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 蛋白转膜N端测序
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704579825

金虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白转膜N端测序

各位战友：
    我近来在做蛋白转膜，用于N端测序，但是蛋白一直没有转到膜上，预染marker转的很好！
    我的蛋白分子量约12kDa，用恒流跑，电流I=0.65*S ，其中S为胶的面积，我跑的是Tricine-SDS-PAGE。
    我试过转膜时间30min，60min，90min，120min，但考染后都没有看见条带，我的时间设置有问题吗？
    另外，我在蛋白跑Tricine-SDS-PAGE前，没有煮沸，想问这对转膜有影响吗？N端测序，蛋白可以煮沸后跑胶吗？
    谢谢各位了！这东西弄得太烦了呀，又是毕业季，晕！
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1楼 2014-03-13 23:33:53
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