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longfeng

金虫 (小有名气)

[求助] 酵母双杂交中BD和AD连接的蛋白有区别吗? 已有3人参与

运用Gal4 系统做酵母双杂交实验,采用gateway方法构建载体,使用菌株为AH109。
分别构建了目标基因连接BD和AD的载体,靶基因也分别构建了连接AD和BD的载体。
实验结果中当目标基因连接AD,靶基因连接BD时在缺陷型培养基上会出现相互作用。但当目标基因连接BD,靶基因连接AD时则不会出现相互作用。
不知其他大侠出现这种情况没?怎么解释?
望赐教
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TOMATURE

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by oylb at 2014-02-25 10:16:56
应该是靶基因有转录激活结构域,导致假阳性结果。

你可以做个自激活实验进行检验。靶基因连接BD进行单质粒转化,看是否能激活报告基因的表达。如果能,证明确实是靶基因转录激活结构域导致的假阳性结果。

你好,怎么才能确定真正有自激活现象?
7楼2014-04-09 23:14:59
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查看全部 9 个回答

oylb

禁言 (正式写手)

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-25 15:15:15
本帖内容被屏蔽

2楼2014-02-25 10:16:56
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longfeng

金虫 (小有名气)

送红花一朵
谢谢!
我试一下
3楼2014-02-25 17:15:55
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激情海洋

银虫 (小有名气)

先确定是否有自激活?
4楼2014-02-26 15:53:16
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