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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酵母双杂交中BD和AD连接的蛋白有区别吗？
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longfeng

金虫 (小有名气)

[求助] 酵母双杂交中BD和AD连接的蛋白有区别吗？ 已有3人参与

运用Gal4 系统做酵母双杂交实验，采用gateway方法构建载体，使用菌株为AH109。
分别构建了目标基因连接BD和AD的载体，靶基因也分别构建了连接AD和BD的载体。
实验结果中当目标基因连接AD，靶基因连接BD时在缺陷型培养基上会出现相互作用。但当目标基因连接BD，靶基因连接AD时则不会出现相互作用。
不知其他大侠出现这种情况没？怎么解释？
望赐教
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longfeng

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1楼 2014-02-25 09:10:01
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oylb

禁言 (正式写手)
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-02-25 15:15:15
本帖内容被屏蔽
2楼2014-02-25 10:16:56
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longfeng

金虫 (小有名气)
送红花一朵
谢谢！
我试一下
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3楼2014-02-25 17:15:55
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激情海洋

银虫 (小有名气)
先确定是否有自激活？
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4楼2014-02-26 15:53:16
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longfeng

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 激情海洋 at 2014-02-26 15:53:16
先确定是否有自激活？

没有自己激活现象
赞一下 回复此楼
5楼2014-03-03 17:35:15
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

试试有没有自我激发。
赞一下 回复此楼
hehe
6楼2014-03-03 20:20:36
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TOMATURE

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by oylb at 2014-02-25 10:16:56
应该是靶基因有转录激活结构域，导致假阳性结果。

你可以做个自激活实验进行检验。靶基因连接BD进行单质粒转化，看是否能激活报告基因的表达。如果能，证明确实是靶基因转录激活结构域导致的假阳性结果。

你好，怎么才能确定真正有自激活现象？
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7楼2014-04-09 23:14:59
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

三个报告基因逐个检测下

[ 发自小木虫客户端 ]
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8楼2014-04-10 07:42:06
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qinyy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
longfeng(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-03 12:25:47
应该说是可以互换的，因为这个互作是可以做switch 的，而且有人这样做，就是你说的互换。
建议： 不论换不换，AD 还是BD都先做一个自激活实验。
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9楼2014-07-02 18:39:18
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