24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2675  |  回复: 43
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

bobcanada

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] HPLC问题求助高手 已有3人参与

2000年购买的Bio-Rad 公司的Biologic DuoFlow Chromatography System,一直用于分析蛋白质(凝胶色谱及离子交换色谱)。最近3-4年没有人使用了,一直闲置。现在想用于反相HPLC分析,所以新买了C18色谱柱,但还没有连接上C18色谱柱。准备先试验一下系统是否还工作。遇到了麻烦。

流动相A: 0.1% TFA/水;流动相B: 0.1% 乙腈。使用前,2个流动相溶液都分别用超声波清洗器做15分钟脱气处理。

开始试验系统。流动相:A 90%, B 10%,走3分钟;然后A从 90%到0%, B从 10%到100%,走25分钟。

可以看到,没有连接色谱柱的情况下,色谱图出现很多峰,特别是在走梯度的时候。如果单纯走水,没有这些峰。

水占90%的时候,峰也很少。好像是每间隔2分钟,就出1个峰。是气泡峰吗?还是以前管线里面沉积的蛋白残留物?

本人没有操作过HPLC,是新手,身边没有人请教。现请教小木虫上都专家和高手,怎么解决?万分感谢!
HPLC问题求助高手
HPLC-BioLogic DuoFlow.PNG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

小木虫-知识宝库的入口。今天,你小木虫了没有?
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bobcanada

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
4楼: Originally posted by whynotbest at 2014-02-08 02:48:08
不管你乙腈是哪里来的 你起码可以一个个排除可能的因素试试...

如何检查HPLC专用的乙腈或甲醇是否有问题?我没有经验。谢谢!
小木虫-知识宝库的入口。今天,你小木虫了没有?
8楼2014-02-08 04:06:07
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 44 个回答

whynotbest

至尊木虫 (职业作家)

淫虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
bobcanada(费姚永芬代发): 金币+5, 谢谢交流,欢迎常来分析版,辛苦了 2014-02-11 08:13:53
先看看你的乙腈是不是有问题吧
WorkFinishPublish
2楼2014-02-08 02:04:24
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bobcanada

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
2楼: Originally posted by whynotbest at 2014-02-08 02:04:24
先看看你的乙腈是不是有问题吧

乙腈是EMD公司的HPLC专用乙腈。

产品订购来源:
https://ca.vwr.com/store/catalog ... g_number=CAAX0145-1

产品检验报告:https://ca.vwr.com/stibo/hi_res/10646475.pdf
小木虫-知识宝库的入口。今天,你小木虫了没有?
3楼2014-02-08 02:42:16
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whynotbest

至尊木虫 (职业作家)

淫虫

引用回帖:
3楼: Originally posted by bobcanada at 2014-02-08 02:42:16
乙腈是EMD公司的HPLC专用乙腈。

产品订购来源:
https://ca.vwr.com/store/catalog/product.jsp?catalog_number=CAAX0145-1

产品检验报告:https://ca.vwr.com/stibo/hi_res/10646475.pdf...

不管你乙腈是哪里来的 你起码可以一个个排除可能的因素试试
WorkFinishPublish
4楼2014-02-08 02:48:08
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿西北工业大学289 085602 +31 yang婷 2026-04-10 31/1550 2026-04-11 00:19 by gong120082
[材料工程] 材料调剂推荐 +8 蛋糕x2 2026-04-07 8/400 2026-04-10 23:13 by Ftglcn90
[考研] 药学专硕调剂 +6 ? 一路生?花? 2026-04-10 7/350 2026-04-10 21:08 by zhouxiaoyu
[考研] 273求调剂 +51 麦小叮当 2026-04-06 58/2900 2026-04-10 15:54 by jiajinhpu
[考研] 机械还有还有名额吗?太难了 +6 笑笑袁 2026-04-10 6/300 2026-04-10 11:54 by 高维春
[考研] 电子信息279求调剂,有书读就行 +4 wwwooden 2026-04-08 7/350 2026-04-10 11:34 by wwwooden
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +3 努力的夏末 2026-04-09 3/150 2026-04-10 10:12 by 314126402
[考研] 087100初试311求调剂 +3 任雅琴 2026-04-09 3/150 2026-04-09 22:42 by lbsjt
[考研] 调剂 +8 只叙离别辞 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:25 by zl8213662
[考研] 267求调剂 +5 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 5/250 2026-04-09 18:47 by stone_128
[考研] 070300化学学硕311分求调剂 +18 梁富贵险中求 2026-04-04 20/1000 2026-04-09 11:18 by 哒哒哒呱呱呱
[考研] 286求调剂 +19 Faune 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 08:36 by 哦哦123
[考研] 270求调剂 +3 031127 2026-04-06 4/200 2026-04-08 21:00 by 逆水乘风
[考研] 化学0703-一志愿211-338分求调剂 +10 vants 2026-04-05 11/550 2026-04-08 16:02 by screening
[考研] 298求调剂 +4 残荷新柳 2026-04-07 4/200 2026-04-07 23:02 by lbsjt
[考研] 286求调剂 +20 Faune 2026-04-06 20/1000 2026-04-07 11:33 by 诗与自由
[考研] 297分083200求助 +9 aekx 2026-04-05 9/450 2026-04-06 20:57 by flysky1234
[考研] 一志愿C9的化学工程(085602) 340分,感觉校内调剂无望,求调剂 +12 万事宜臻 2026-04-04 12/600 2026-04-06 07:46 by 无际的草原
[考研] 348求调剂 +6 wukira 2026-04-04 6/300 2026-04-05 18:11 by 猪会飞
[考研] 一志愿南农090401,268,求调剂 +5 一木鸟然 2026-04-04 5/250 2026-04-04 17:07 by babysonlkd
信息提示
请填处理意见