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晴紫0915

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC紫外吸收的问题

我做的东西是个25肽，按说这么多肽键，在220nm处的吸收峰应该蛮高，但是结果却不高！而且在3min左右出来一个很高的峰，就把12min的峰压低了，不好分辨，进样峰也不可能这么高吧？254同样情况。280则没有所谓的高进样峰，所以12min处吸收虽然也低，但是峰形还比较好。所谓进样峰难道是盐分？盐分有吸收吗？我盐分可能的话是醋酸盐或者含碘的盐。增加浓度变化不大。流动相是乙腈和水。肽有1个Tyr，其他没苯环。我真的不明白了，紫外吸收咋这么低呢？点TLC板蛮明显的。求助！！望各路神仙踊跃解答，谢谢！

[ Last edited by 晴紫0915 on 2012-10-19 at 11:16 ]
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做最好的自己
1楼 2012-10-19 11:13:52
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swallow13

禁虫 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+1, 鼓励交流，欢迎常来~ 2012-10-19 13:41:52
本帖内容被屏蔽
2楼2012-10-19 12:33:25
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
合成的MM辛苦了。醋酸应该不会有很强的峰，估计是碘离子。
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3楼2012-10-19 15:07:11
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晴紫0915

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by swallow13 at 2012-10-19 12:33:25
lz是做固相合成的吗？Fmoc策略的？看样子我遇到同行了 呵呵 肽链长并不意味着紫外吸收就高 3min的峰根据我的经验 是DMF的峰 原因大概是树脂洗完后没干燥完全就做切割了

对啊，fmoc固相合成。。同行！但是220nm不是酰胺键的吸收咩？我觉着酰胺键多了吸收应该强哒啊。DMF原先以为没有紫外吸收呢，刚电板看了竟然有！谢谢啦~！
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做最好的自己
4楼2012-10-20 11:13:33
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晴紫0915

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ltxin2009 at 2012-10-19 15:07:11
合成的MM辛苦了。醋酸应该不会有很强的峰，估计是碘离子。

恩恩，还好啦~~ 刚查了一下发现，碘在220和280确实有较强紫外吸收，254较弱，与我的比较相符，谢谢啦~
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做最好的自己
5楼2012-10-20 11:15:36
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