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晴紫0915

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC紫外吸收的问题

我做的东西是个25肽,按说这么多肽键,在220nm处的吸收峰应该蛮高,但是结果却不高!而且在3min左右出来一个很高的峰,就把12min的峰压低了,不好分辨,进样峰也不可能这么高吧?254同样情况。280则没有所谓的高进样峰,所以12min处吸收虽然也低,但是峰形还比较好。所谓进样峰难道是盐分?盐分有吸收吗?我盐分可能的话是醋酸盐或者含碘的盐。增加浓度变化不大。流动相是乙腈和水。肽有1个Tyr,其他没苯环。我真的不明白了,紫外吸收咋这么低呢?点TLC板蛮明显的。求助!!望各路神仙踊跃解答,谢谢!

[ Last edited by 晴紫0915 on 2012-10-19 at 11:16 ]
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做最好的自己
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swallow13

禁虫 (正式写手)


感谢参与,应助指数 +1
crity328: 金币+1, 鼓励交流,欢迎常来~ 2012-10-19 13:41:52
本帖内容被屏蔽

2楼2012-10-19 12:33:25
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
合成的MM辛苦了。醋酸应该不会有很强的峰,估计是碘离子。
3楼2012-10-19 15:07:11
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晴紫0915

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by swallow13 at 2012-10-19 12:33:25
lz是做固相合成的吗?Fmoc策略的?看样子我遇到同行了 呵呵 肽链长并不意味着紫外吸收就高 3min的峰根据我的经验 是DMF的峰 原因大概是树脂洗完后没干燥完全就做切割了

对啊,fmoc固相合成。。同行!但是220nm不是酰胺键的吸收咩?我觉着酰胺键多了吸收应该强哒啊。DMF原先以为没有紫外吸收呢,刚电板看了竟然有!谢谢啦~!
做最好的自己
4楼2012-10-20 11:13:33
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晴紫0915

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ltxin2009 at 2012-10-19 15:07:11
合成的MM辛苦了。醋酸应该不会有很强的峰,估计是碘离子。

恩恩,还好啦~~ 刚查了一下发现,碘在220和280确实有较强紫外吸收,254较弱,与我的比较相符,谢谢啦~
做最好的自己
5楼2012-10-20 11:15:36
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