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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA的质量好坏标准
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)

[求助] RNA的质量好坏标准 已有3人参与

提取总RNA之后质量检测标准：A260/A230值为大于2.0，A260/A280值为介于1.8-2.0之间，达到这样要求的RNA质量是好的，那小RNA的质量检测是不是也是要达到这个标准才算好的呢？求指教！
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如果不努力，肯定没收获！
1楼 2014-01-10 22:15:15
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-11 23:33:55
没入尘埃5: 金币+4, ★有帮助, 谢谢 2014-01-15 10:14:09
你说的这个标准只是核酸样品的纯度标准，如果是纯净的RNA，A260/280为2。至于完整性，很难用吸光值来判断，通常是跑胶来看的。如果提取的是总RNA，由于rRNA的比例非常高，结果反映的是rRNA的情况。你要做小RNA，我觉得你还是跑胶观察比较靠谱。
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没入尘埃5
2楼2014-01-11 01:37:52
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-11 01:37:52
你说的这个标准只是核酸样品的纯度标准，如果是纯净的RNA，A260/280为2。至于完整性，很难用吸光值来判断，通常是跑胶来看的。如果提取的是总RNA，由于rRNA的比例非常高，结果反映的是rRNA的情况。你要做小RNA，我觉 ...

那小RNA的纯度能不能用吸光值的这个标准来判断呢？跑胶图也不能放到小文章里，说小RNA提取质量的话是不是可以用这个吸光值来说呢？
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如果不努力，肯定没收获！
3楼2014-01-11 08:40:17
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 没入尘埃5 at 2014-01-11 08:40:17
那小RNA的纯度能不能用吸光值的这个标准来判断呢？跑胶图也不能放到小文章里，说小RNA提取质量的话是不是可以用这个吸光值来说呢？...

吸光度比值只是核酸纯度的一个指标，样品究竟好不好并不清楚，也没人把这些数据放在文章里。我倒是看到过别人发表跑小RNA的胶的图片。
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4楼2014-01-11 17:11:30
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-11 23:34:06
没入尘埃5: 金币+4, 谢谢参与 2014-01-15 10:13:53
小RNA质量的检测一般都是跑胶看的。也有买miRNA检测的kit的不过就是花钱。
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hehe
5楼2014-01-11 20:01:37
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luogt21

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
没入尘埃5: 金币+2, 谢谢参与 2014-01-15 10:13:42
A260/A280比值是用于判断RNA纯度的，至于你说的质量标准，如果考虑的是RNA的完整性的话就需要用RNA样品进行电泳跑胶了，如果可以看到28S（约4.5kb）、18S（约2.1kb）和5S（约0.1-0.3kb）小分子RNA条带的话，则说明完整性好。
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6楼2014-01-11 21:04:53
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-01-11 20:01:37
小RNA质量的检测一般都是跑胶看的。也有买miRNA检测的kit的不过就是花钱。

没有像总RNA那样具体的数据吗？
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如果不努力，肯定没收获！
7楼2014-01-12 09:42:54
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by luogt21 at 2014-01-11 21:04:53
A260/A280比值是用于判断RNA纯度的，至于你说的质量标准，如果考虑的是RNA的完整性的话就需要用RNA样品进行电泳跑胶了，如果可以看到28S（约4.5kb）、18S（约2.1kb）和5S（约0.1-0.3kb）小分子RNA条带的话，则说明完 ...

那小RNA的纯度有没有这样的标准呢？
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如果不努力，肯定没收获！
8楼2014-01-12 09:44:09
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五月的风子

铜虫 (正式写手)
来学习了~
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一心一意 是世上最温柔的力量
9楼2014-11-10 19:13:01
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