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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 有关大肠杆菌OD值，急急急！！！
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woshiguiren

木虫 (小有名气)

[求助] 有关大肠杆菌OD值，急急急！！！已有4人参与

实验室条件有限，想请教一下大肠杆菌培养多久OD600可以达到4.5，陪养条件是37℃，190rpm？如果IPTG诱导，又得多长时间？告知个大概时间就行，是不是过夜？（菌的情况良好）

[ Last edited by woshiguiren on 2014-1-7 at 14:09 ]
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充实的生活
1楼2014-01-07 14:08:07
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
woshiguiren: 金币+5 2014-01-29 12:33:52
如果不做高密度发酵，大肠杆菌的OD很难达到4.5。普通试管摇过夜通常是2左右。
IPTG的诱导的浓度、时间和温度对不同的蛋白不一样，需要自己试。通常要先做预实验优化诱导条件。
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2楼2014-01-07 14:22:42
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woshiguiren

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-07 14:22:42
如果不做高密度发酵，大肠杆菌的OD很难达到4.5。普通试管摇过夜通常是2左右。
IPTG的诱导的浓度、时间和温度对不同的蛋白不一样，需要自己试。通常要先做预实验优化诱导条件。

请问，大肠杆菌，液体培养，过夜（14-16小时）OD600一般能够有多大？
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充实的生活
3楼2014-01-07 14:38:38
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woshiguiren

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-07 14:22:42
如果不做高密度发酵，大肠杆菌的OD很难达到4.5。普通试管摇过夜通常是2左右。
IPTG的诱导的浓度、时间和温度对不同的蛋白不一样，需要自己试。通常要先做预实验优化诱导条件。

不是试管，是锥形瓶液体培养
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充实的生活
4楼2014-01-07 14:40:04
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2014-01-07 22:38:53
大肠杆菌液体培养OD值大小跟培养基也有关系，这个已经做过验证，用改过后的配方一般培养为24hr，IPTG诱导时间，温度及时间长短像2楼所说一样，你得自个去摸索，去优化。祝楼主好运！
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希望大家多多交流。
5楼2014-01-07 16:22:29
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
woshiguiren: 金币+5 2014-01-29 12:33:28
培养到4.5是能做到的，需要12小时左右。
将菌在平板和种子瓶中活化好转接培养基就可以。
但是，如楼上面说的，与培养基和培养条件也有关系。
祝好运！
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6楼2014-01-07 22:36:55
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是LB吗? 感觉LB要到4.5很难啊,
可以用TB培养
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
7楼2014-01-07 23:42:33
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by woshiguiren at 2014-01-07 14:38:38
请问，大肠杆菌，液体培养，过夜（14-16小时）OD600一般能够有多大？...

锥形瓶摇菌过夜后的OD与试管差不多，OD600一般是2多一点。我一般是用LB摇的，其它rich培养基可能会有不同的OD。
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8楼2014-01-08 01:20:22
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战斗节能

金虫 (小有名气)
培养多久OD600可以达到4.5看接种量！诱导可以过夜也可以不过夜，看你诱导温度，和需要的表达量等！
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9楼2014-06-18 16:23:45
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