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如何提取细胞中的线粒体?
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酷哥哥1990
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专业: 中药药效物质
[
求助
]
如何提取细胞中的线粒体?
已有4人参与
求助细胞中线粒体的提取方法。查了下资料,看到好几种说法:
①直接套用组织中线粒体的提取方法:胰酶消化后得细胞,加入分离介质(250mM蔗糖,1mM EDTA,10mM tris-Hcl),于匀浆器中制成匀浆,在4℃离心机中1000g 离心10min后,弃沉淀,收集上清;再以12000g离心,15min后弃上清,收集沉淀,用分离介质将沉淀悬浮,重复12000g离心,15min后收集沉淀得到线粒体。
②细胞弃去培养液后,用细胞收集液作用2到3分钟,用scraper,将细胞收集起来,6000g,离心15分钟。弃上清,之后加细胞匀浆液,用匀浆器或手动匀浆管匀浆,之后按要求离心。 那么请问细胞收集液指的是什么?细胞匀浆液指的是什么?
③超声提取 这个可以吗?
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1楼
2014-01-03 17:53:44
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2014-01-26 05:46:36
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5楼
2014-01-26 03:31:06
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jurkat.1640
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专业: 病毒学
【答案】应助回帖
试剂盒能解决的问题都不算问题
实验室没人会就用试剂盒。
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2楼
2014-01-08 14:33:44
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2014-01-13 19:04:39
gyesang: 金币+2, 鼓励交流!
2014-01-26 05:46:08
蔗糖梯度离心法,找篇nature protocol一看就会
[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼
2014-01-08 23:46:30
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酷哥哥1990
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3楼
:
Originally posted by
llfxcy
at 2014-01-08 23:46:30
蔗糖梯度离心法,找篇nature protocol一看就会
怎么找?或者你有的话能直接给我吗?
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4楼
2014-01-13 19:04:20
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