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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 如何提取细胞中的线粒体？
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酷哥哥1990

金虫 (小有名气)

[求助] 如何提取细胞中的线粒体？ 已有4人参与

求助细胞中线粒体的提取方法。查了下资料，看到好几种说法：
①直接套用组织中线粒体的提取方法：胰酶消化后得细胞，加入分离介质（250mM蔗糖，1mM EDTA，10mM tris-Hcl），于匀浆器中制成匀浆，在4℃离心机中1000g 离心10min后，弃沉淀，收集上清；再以12000g离心，15min后弃上清，收集沉淀，用分离介质将沉淀悬浮，重复12000g离心，15min后收集沉淀得到线粒体。
②细胞弃去培养液后，用细胞收集液作用2到3分钟，用scraper,将细胞收集起来，6000g,离心15分钟。弃上清，之后加细胞匀浆液，用匀浆器或手动匀浆管匀浆，之后按要求离心。            那么请问细胞收集液指的是什么？细胞匀浆液指的是什么？
③超声提取                          这个可以吗？
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1楼 2014-01-03 17:53:44
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

试剂盒能解决的问题都不算问题
实验室没人会就用试剂盒。
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2楼2014-01-08 14:33:44
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llfxcy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
酷哥哥1990: 金币+5, ★有帮助 2014-01-13 19:04:39
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-26 05:46:08
蔗糖梯度离心法，找篇nature protocol一看就会

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3楼2014-01-08 23:46:30
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酷哥哥1990

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by llfxcy at 2014-01-08 23:46:30
蔗糖梯度离心法，找篇nature protocol一看就会

怎么找？或者你有的话能直接给我吗？
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4楼2014-01-13 19:04:20
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匿名

用户注销 (小有名气)
★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励交流！ 2014-01-26 05:46:36
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5楼2014-01-26 03:31:06
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匿名

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6楼2014-01-26 03:31:44
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

3楼正解，离两次心就好了
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7楼2014-01-28 09:54:12
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huiting410

金虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ericyo918 at 2014-01-28 09:54:12
3楼正解，离两次心就好了

可以再帮我讲一遍吗，我想检测细胞质中蛋白，不需要线粒体，谢谢
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8楼2015-01-04 21:50:20
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
8楼: Originally posted by huiting410 at 2015-01-04 22:50:20
可以再帮我讲一遍吗，我想检测细胞质中蛋白，不需要线粒体，谢谢...

检测细胞质中的蛋白不需要刻意的去除线粒体吧
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9楼2015-01-05 11:02:24
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huiting410

金虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by ericyo918 at 2015-01-05 11:02:24
检测细胞质中的蛋白不需要刻意的去除线粒体吧...

我要检测细胞是色素c的释放
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10楼2015-01-06 15:49:56
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