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酷哥哥1990

金虫 (小有名气)

[求助] 如何提取细胞中的线粒体?已有4人参与

求助细胞中线粒体的提取方法。查了下资料,看到好几种说法:
①直接套用组织中线粒体的提取方法:胰酶消化后得细胞,加入分离介质(250mM蔗糖,1mM EDTA,10mM tris-Hcl),于匀浆器中制成匀浆,在4℃离心机中1000g 离心10min后,弃沉淀,收集上清;再以12000g离心,15min后弃上清,收集沉淀,用分离介质将沉淀悬浮,重复12000g离心,15min后收集沉淀得到线粒体。
②细胞弃去培养液后,用细胞收集液作用2到3分钟,用scraper,将细胞收集起来,6000g,离心15分钟。弃上清,之后加细胞匀浆液,用匀浆器或手动匀浆管匀浆,之后按要求离心。            那么请问细胞收集液指的是什么?细胞匀浆液指的是什么?
③超声提取                          这个可以吗?
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

试剂盒能解决的问题都不算问题
实验室没人会就用试剂盒。
2楼2014-01-08 14:33:44
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llfxcy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
酷哥哥1990: 金币+5, 有帮助 2014-01-13 19:04:39
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-01-26 05:46:08
蔗糖梯度离心法,找篇nature protocol一看就会

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-01-08 23:46:30
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酷哥哥1990

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by llfxcy at 2014-01-08 23:46:30
蔗糖梯度离心法,找篇nature protocol一看就会

怎么找?或者你有的话能直接给我吗?
4楼2014-01-13 19:04:20
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匿名

用户注销 (小有名气)

★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励交流! 2014-01-26 05:46:36
本帖仅楼主可见
5楼2014-01-26 03:31:06
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匿名

用户注销 (小有名气)

本帖仅楼主可见
6楼2014-01-26 03:31:44
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

3楼正解,离两次心就好了
7楼2014-01-28 09:54:12
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huiting410

金虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by ericyo918 at 2014-01-28 09:54:12
3楼正解,离两次心就好了

可以再帮我讲一遍吗,我想检测细胞质中蛋白,不需要线粒体,谢谢
8楼2015-01-04 21:50:20
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ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
8楼: Originally posted by huiting410 at 2015-01-04 22:50:20
可以再帮我讲一遍吗,我想检测细胞质中蛋白,不需要线粒体,谢谢...

检测细胞质中的蛋白不需要刻意的去除线粒体吧
9楼2015-01-05 11:02:24
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huiting410

金虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by ericyo918 at 2015-01-05 11:02:24
检测细胞质中的蛋白不需要刻意的去除线粒体吧...

我要检测细胞是色素c的释放
10楼2015-01-06 15:49:56
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