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dehong1573至尊木虫 (正式写手)
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[求助]
黄单胞菌总DNA提取
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| 我用SDS裂解法提取黄单胞菌的总DNA，在加NaCl离心后，粘乎乎的很难吸取上清。各位虫友有什么好 的解决办法？ |
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tuobaohua
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2楼2011-08-11 12:35:08
3楼2011-08-11 12:47:44
dehong1573
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4楼2011-08-11 14:42:38
dehong1573
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5楼2011-08-11 14:44:01
老夏853
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6楼2011-08-13 19:18:33
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
dehong1573(金币+3): 非常感谢，我用的是SDS裂解法，就是用2%SDS 55度裂解半小时，再加5M的NaCl离心取上清，然后用乙醇沉淀。 2011-08-14 08:40:46
rainwander(金币+5, MicEPI+1): 鼓励交流 2011-08-14 10:08:29
dehong1573(金币+5): 2011-08-16 17:14:36
dehong1573(金币+3): 非常感谢，我用的是SDS裂解法，就是用2%SDS 55度裂解半小时，再加5M的NaCl离心取上清，然后用乙醇沉淀。 2011-08-14 08:40:46
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dehong1573(金币+5): 2011-08-16 17:14:36
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1.如楼上所述，减少细菌量；如果要求的纯度不是很高的话，可以不用考虑那么多。 2.既然做实验嘛，个人觉得还是认真一些比较好，之前我也提了很多次，也有跟楼主同样的现象，我的做法是：用量程较小的移液枪来吸上层，比如10μl、200μl的移液枪，再把枪头稍微减去一点。总之能减少吸力的方法就好。 3、换用另一种提细菌总DNA的方法，不知道楼主采用的是什么方法，我后来利用的是范秀荣编写的《微生物学实验》，方法还是比较传统的，但经过几种方法比较，他的效果还算挺好的，可以利用多种方法试试看。 |
7楼2011-08-13 22:34:29
zj2008wx
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10楼2013-12-25 17:01:26
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