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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

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[求助] 黄单胞菌总DNA提取

我用SDS裂解法提取黄单胞菌的总DNA，在加NaCl离心后，粘乎乎的很难吸取上清。各位虫友有什么好的解决办法？

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科学永无止境,只有合作共享才能更好地……

1楼2011-08-11 11:08:47

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Virginiaの

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dehong1573(金币+3): 非常感谢，我用的是SDS裂解法，就是用2%SDS 55度裂解半小时，再加5M的NaCl离心取上清，然后用乙醇沉淀。 2011-08-14 08:40:46
rainwander(金币+5, MicEPI+1): 鼓励交流 2011-08-14 10:08:29
dehong1573(金币+5): 2011-08-16 17:14:36

1.如楼上所述，减少细菌量；如果要求的纯度不是很高的话，可以不用考虑那么多。
2.既然做实验嘛，个人觉得还是认真一些比较好，之前我也提了很多次，也有跟楼主同样的现象，我的做法是：用量程较小的移液枪来吸上层，比如10μl、200μl的移液枪，再把枪头稍微减去一点。总之能减少吸力的方法就好。
3、换用另一种提细菌总DNA的方法，不知道楼主采用的是什么方法，我后来利用的是范秀荣编写的《微生物学实验》，方法还是比较传统的，但经过几种方法比较，他的效果还算挺好的，可以利用多种方法试试看。