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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 新手求助 液相检测血药浓度
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yan0495

铁虫 (正式写手)

[求助] 新手求助 液相检测血药浓度 已有1人参与

实验目的是检测不同时间点的血药浓度变化。采用小鼠灌胃给药，在给药后15分钟，30分钟，1小时分别取血（每个时间点处死1只小鼠），3000g离心15min取上清100微升，加入500微升甲醇混匀沉淀后3000g离心5分钟，取上清过滤进样检测。
现在遇到以下问题：
1. 药物水溶液在19分钟左右出峰，药物血浆溶液也是在19分钟左右出峰，但是在15-19分钟之间出现的峰不知道是什么（空白血浆溶液在此时间段没有任何峰）？？？
2. 在20分钟后出现了倒峰，不知道是什么问题？？
3. 在三个时间点取血检测的药物峰面积15分钟最高，30分钟最低，1小时居中，文献上报道是递减，这是什么原因？？
附图
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    • 2013-12-18 10:15:17, 52.18 K

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1楼 2013-12-18 10:15:43
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rosegarden

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yan0495: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-12-19 08:54:23
1.生物样本测试，我用的基本上是液质，没有用过液相。你的色谱图已经达到了基线分离，15-19min的峰对你测定没有影响啊。我认为是可以接受的。空白血还有个体差异呢，你的给药组都有这个峰吗？
2.倒峰不清楚，对液相不熟悉，只要不影响测定
3.你的采血点只有三个点？
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坚持
2楼2013-12-18 11:08:35
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yan0495

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by rosegarden at 2013-12-18 11:08:35
1.生物样本测试，我用的基本上是液质，没有用过液相。你的色谱图已经达到了基线分离，15-19min的峰对你测定没有影响啊。我认为是可以接受的。空白血还有个体差异呢，你的给药组都有这个峰吗？
2.倒峰不清楚，对液相 ...

1. 给药组都有
3. 采血点只设了三个，应该需要设几个合适？
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3楼2013-12-18 11:32:22
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rosegarden

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yan0495 at 2013-12-18 11:32:22
1. 给药组都有
3. 采血点只设了三个，应该需要设几个合适？...

你做的是哪方面的实验？要得到可靠的药动学参数
给药前需要采血作为空白样品。为获得给药后的一个
完整的血药浓度-时间曲线，采样时间点的设计应兼顾药物的吸收相、平衡
相（峰浓度附近）和消除相。一般在吸收相至少需要2~3 个采样点，对于
吸收快的血管外给药的药物，应尽量避免第一个点是峰浓度（Cmax）；在
Cmax附近至少需要3 个采样点；消除相需要4~6 个采样点。整个采样时间
至少应持续到3~5 个半衰期，或持续到血药浓度为Cmax的1/10~1/20。
以上是药审中心的临床前药动学指导原则
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坚持
4楼2013-12-18 12:19:23
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yan0495

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by rosegarden at 2013-12-18 12:19:23
你做的是哪方面的实验？要得到可靠的药动学参数
给药前需要采血作为空白样品。为获得给药后的一个
完整的血药浓度-时间曲线，采样时间点的设计应兼顾药物的吸收相、平衡
相（峰浓度附近）和消除相。一般在吸收相 ...

目前我们是打算实验不同溶剂配置的药物的血药浓度有何不同，寻找最合适的药物配置方法
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5楼2013-12-19 08:52:15
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rosegarden

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yan0495 at 2013-12-19 08:52:15
目前我们是打算实验不同溶剂配置的药物的血药浓度有何不同，寻找最合适的药物配置方法...

你的采血点太少了，我知道的信息也太少了。不能判断你的一小时点，是你自己样品处理过程中污染导致测得浓度过高，还是药物本身的二次吸收。
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坚持
6楼2013-12-19 16:51:48
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