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HPLC测含量摸索流动相的问题
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王文静341
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[交流]
HPLC测含量摸索流动相的问题
求助:HPLC同时测定复方中两种成分,分别是碱性物质和酸性物质,用过甲醇/乙腈-酸水、乙腈-磷酸盐流动相,但分离效果不好,请问流动相我接下来该采用什么思路摸索,哪位大神给建议,万分感激!
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1楼
2013-12-06 10:30:58
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王文静341
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3楼
:
Originally posted by
helious
at 2013-12-06 10:43:00
你用的这两种物质是不是极性特别大啊,如果是的话就得在色谱柱上下功夫了,换个氨基柱估计会好点,方法上估计没什么突破,一般也就是缓冲盐-甲醇梯度洗脱
还想请教个问题,是甲醇-磷酸盐和乙腈-磷酸盐作为流动相什么不同,常见是用后者,为什么呢?
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12楼
2013-12-06 16:44:40
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王文静341: 金币+1
2013-12-06 16:41:00
乙腈-磷酸盐流动相,加点磷酸调一下pH试试看。酸性、碱性物质,调pH是比较好的选择,不行再试试梯度。
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2楼
2013-12-06 10:39:42
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helious
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王文静341: 金币+1
2013-12-06 16:41:49
你用的这两种物质是不是极性特别大啊,如果是的话就得在色谱柱上下功夫了,换个氨基柱估计会好点,方法上估计没什么突破,一般也就是缓冲盐-甲醇梯度洗脱
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3楼
2013-12-06 10:43:00
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王文静341: 金币+1
2013-12-06 16:41:27
首先,楼主的酸性物质和碱性物质极性相差有多大?
极性大,可考虑氨基柱;
不大,可直接用磷酸盐缓冲液(PH4.0至6.5)-乙腈。
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2013-12-06 10:53:45
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