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王文静341

新虫 (初入文坛)


[交流] HPLC测含量摸索流动相的问题

求助:HPLC同时测定复方中两种成分,分别是碱性物质和酸性物质,用过甲醇/乙腈-酸水、乙腈-磷酸盐流动相,但分离效果不好,请问流动相我接下来该采用什么思路摸索,哪位大神给建议,万分感激!
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helious

银虫 (小有名气)



王文静341: 金币+1 2013-12-06 16:41:49
你用的这两种物质是不是极性特别大啊,如果是的话就得在色谱柱上下功夫了,换个氨基柱估计会好点,方法上估计没什么突破,一般也就是缓冲盐-甲醇梯度洗脱
3楼2013-12-06 10:43:00
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王文静341: 金币+1 2013-12-06 16:41:00
乙腈-磷酸盐流动相,加点磷酸调一下pH试试看。酸性、碱性物质,调pH是比较好的选择,不行再试试梯度。
2楼2013-12-06 10:39:42
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顾莫柔

金虫 (正式写手)



王文静341: 金币+1 2013-12-06 16:41:27
首先,楼主的酸性物质和碱性物质极性相差有多大?
极性大,可考虑氨基柱;
不大,可直接用磷酸盐缓冲液(PH4.0至6.5)-乙腈。
4楼2013-12-06 10:53:45
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王文静341: 金币+1 2013-12-06 16:41:39
如果你用的是常规色谱柱的话,可能要好好摸索一下流动相的pH值,这个对酸碱物质的保留时间有影响。你可以结合物质的pKa,先调节pH保证一个呈分析态走一个试试,还可以试试梯度。
5楼2013-12-06 11:28:00
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