24小时热门版块排行榜    

查看: 2060  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

liangpz

铁虫 (小有名气)

[求助] 提取RNA的试剂配制,水饱和酚里面溶解不了氯化钠啊~~求帮助啊~~ 已有1人参与

最近在试用一新改进的方法提取RNA,文献里面的某提取液为:酸酚((pH 4.5);2.5 M NaCl;0.5% SDS。

我买了提取RNA用的水饱和酚,可是加入称好的 NaCl和SDS后完全没有办法溶解,搅拌和加热都没有效果,等了一晚,也还是没有溶。

想问问大家,有人用过水饱和酚做溶剂,溶解别的试剂吗?都是怎么溶的啊??还是说水饱和酚本来就没有办法做溶剂,只能独自使用呢?

好着急,各路大神小神帮帮忙啊~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liangpz at 2013-11-27 15:14:06
非常感谢应助
我也觉得在有机相中溶解盐很费解,但是感觉原文就是这个意思啊。
附原文试剂部分:
• Extraction buffer I Cetyl trimethyl ammonium bromide(CTAB, 2% (w/v); Sigma, USA), 3.5 M gu ...

我也不清楚为什么缓冲液II会是这样。通常就直接用酚抽提了。我觉得会不会是先用2.5M NaCl,0.5% SDS去饱和酚,然后用盐和SDS饱和过的酚抽提?
4楼2013-11-28 00:33:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-27 12:45:51
liangpz: 金币+3, 有帮助 2013-11-28 09:53:45
盐这类极性分子怎么会溶解在酚里呢,更何况是2.5M的。我觉得你需要仔细阅读提取方法和试剂。酚一般是用来破碎细胞和抽提蛋白的,在酸性条件下,RNA不溶于酚而溶解在水相里。
2楼2013-11-27 12:33:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liangpz

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-27 12:33:51
盐这类极性分子怎么会溶解在酚里呢,更何况是2.5M的。我觉得你需要仔细阅读提取方法和试剂。酚一般是用来破碎细胞和抽提蛋白的,在酸性条件下,RNA不溶于酚而溶解在水相里。

非常感谢应助
我也觉得在有机相中溶解盐很费解,但是感觉原文就是这个意思啊。
附原文试剂部分:
• Extraction buffer I Cetyl trimethyl ammonium bromide(CTAB, 2% (w/v); Sigma, USA), 3.5 M guanidinethiocyanate (GTC) (Sigma, USA), 100 mM sodiumcitrate buffer (pH 4.5), 3 M Potassium acetate (Sigma,USA), 1.0% sodium dodecyl sulfate (SDS) (Sigma,USA) (added just before the start of experiment) andRNase free water for final volume makeup.

• Extraction buffer IIAcidic phenol (pH 4.5) (Sigma,USA), 2.5 M sodium chloride (Sigma, USA), 0.5%SDS.

• Chloroform: Isoamyl alcohol (24:1)
• 12 M LiCl
• Ethanol (absolute and 70%)
• RNase free water


中间的缓冲液II就是我疑惑的部分,麻烦再帮我看看,难道是我理解错了吗?谢谢了!
3楼2013-11-27 15:14:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liangpz

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-28 00:33:40
我也不清楚为什么缓冲液II会是这样。通常就直接用酚抽提了。我觉得会不会是先用2.5M NaCl,0.5% SDS去饱和酚,然后用盐和SDS饱和过的酚抽提?...

好的,我会自己再试试,然后也问问作者希望能收到回复。
谢谢~
5楼2013-11-28 09:53:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 27/1350 2026-08-18 21:44 by Noways
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 9/450 2026-08-18 20:09 by 奶牛小黑
[基金申请] 朋友圈看到的 +4 wangzilk 2026-08-18 5/250 2026-08-18 19:25 by wangzilk
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +51 医学老男孩 2026-08-13 110/5500 2026-08-18 19:07 by icerianxia
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +9 yuleib84 2026-08-18 10/500 2026-08-18 16:52 by archvillain
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
信息提示
请填处理意见