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昭夕1988

新虫 (初入文坛)

[求助] western之抗体选择问题

我用Native-PAGE跑的胰岛素,转膜后用丽春红可以染出条带,但用博奥森的胰岛素抗体和goat anti-rabbit lgG/HRP(TBST稀释的)4度过夜孵育后,加ECL用凝胶成像仪曝光却不显影,是怎么回事?ECL配制出来是淡棕色还是无色?具体操作是什么,怎样才能让ECL均匀覆盖在膜上?谢谢
western之抗体选择问题
2013-10-02_11-45-26_8bit.png
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彤彤winni

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-06 00:52:43
昭夕1988: 金币+2, 有帮助 2013-11-07 11:55:43
博奥森的抗体做不出来很正常的,我买的β-actin还有问题呢。可以换别家的抗体试试。
人生若只如初见
7楼2013-11-05 21:35:38
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sc5921041

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-04 00:55:39
昭夕1988: 金币+2 2013-11-06 11:08:14
抗体用TBST+3-5%的奶粉稀释。 ECL 显影液有一点就可以了, 可以拿枪头吹打到膜上
nostalgia
2楼2013-11-04 00:24:22
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的一抗是抗兔的吗?
3楼2013-11-04 01:25:59
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昭夕1988

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-04 01:25:59
你的一抗是抗兔的吗?

rabbit anti-insulin
4楼2013-11-04 09:57:38
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