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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 植保 » 酶活力测定中的问题，求关注解答。
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child2012

新虫 (小有名气)

[交流] 酶活力测定中的问题，求关注解答。

关于昆虫体内酶（羧酸酯酶、GST、P450等)活力测定的问题：1 所配置的试剂怎样储存： 放置到-20℃的冰箱中可以吗？能保存多长时间？ 2 在处理后一定时间提取的酶液，来不及测定，应该怎样处理？ 放置到-20℃还是液氮冷冻？ 3 蛋白质含量问题：测定不同酶时 提取方法不同，是不是每种酶液 都要测定其相应的蛋白含量？蛋白质标准曲线做一次即可还是每次测定时都要 做呢？请知道的虫友赐教。
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1楼 2013-10-30 12:02:57
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泥菩萨

金虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
child2012(金币+2): 谢谢参与
child2012: 金币+5 2013-10-30 17:29:33
问题好多啊。回答仅供参考。
试剂，-20，不结冰么？
提取后的酶液，必须及时测，一个人单台分光光度计测定来不及，可以考虑用酶标仪，批量测定。
不同种类酶，蛋白质含量，肯定是你试验所需要的吧，你的实验方案是什么？
测定蛋白质含量的标准曲线，如果你是一种方法测定几种蛋白质含量，比如考马斯亮蓝法，最好是每次测定都要做。如果来不及，可以一批试剂用一次标准曲线。
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23楼2013-10-30 13:30:20
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acokong

版主 (文坛精英)
★
child2012(金币+1): 谢谢参与
这几个酶我没测过，我紧就测的植物酶样给楼主提供个参考：1、一般药品放在4°冰箱即可，一般的试剂配好后能存1个月，最好是2周内用，但一定要注意用是否需棕瓶保存。若是放到-20°保存，用时需在0~4°冰箱中解冻。2.还是最好现提取现测定，若实在做不到，可将上清液储于-20°，用时0~4°解冻。贮存时间一般2周没什么问题，楼主最好做个预实验确定时间。3.蛋白质可仅测一种提取液的。仅供参考，若是楼主要求严谨还是做下预实验吧。
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24楼2013-10-31 14:33:57
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普通回帖

muchfan

木虫 (知名作家)
★
child2012(金币+2): 谢谢参与
Best wishes
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2楼2013-10-30 12:21:20
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checkin

银虫 (知名作家)
★
child2012(金币+2): 谢谢参与
Good luck
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3楼2013-10-30 12:22:20
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lastpython

木虫 (职业作家)
★
child2012(金币+2): 谢谢参与
深深祝福
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4楼2013-10-30 12:22:20
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heibi

金虫 (文坛精英)
★
child2012(金币+2): 谢谢参与
Best wishes
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5楼2013-10-30 12:22:21
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herome

金虫 (知名作家)
★
child2012(金币+2): 谢谢参与
Good luck
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6楼2013-10-30 12:23:23
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niu.bi

木虫 (文坛精英)
★
child2012(金币+2): 谢谢参与
Good luck
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7楼2013-10-30 12:23:27
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求不重复

铁杆木虫 (知名作家)
★
child2012(金币+2): 谢谢参与
blessing
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9楼2013-10-30 12:34:31
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god0729

铁虫 (知名作家)
★
child2012(金币+2): 谢谢参与
深深祝福
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16楼2013-10-30 13:02:06
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qingxiang827

铁虫 (知名作家)
★
child2012(金币+2): 谢谢参与
深深祝福
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18楼2013-10-30 13:05:11
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coco729

铁虫 (知名作家)
★
child2012(金币+2): 谢谢参与
Best wishes
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19楼2013-10-30 13:06:07
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youdao1

铁虫 (知名作家)
★
child2012(金币+2): 谢谢参与
深深祝福
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20楼2013-10-30 13:06:09
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youxi2

铁杆木虫 (知名作家)
★
child2012(金币+2): 谢谢参与
深深祝福
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21楼2013-10-30 13:08:53
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zjhsoda

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问楼主是如何提取酶液的？我上次测的乙酰胆碱酯酶 都是负的……我觉得是酶液没提好
我用的液氮研磨
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25楼2014-05-03 20:51:13
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Smilelzx8楼
2013-10-30 12:23   回复  
child2012(金币+2): 谢谢参与
菲儿fanger10楼
2013-10-30 12:38   回复  
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祝福
xiejf11楼
2013-10-30 12:50   回复  
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天涯201212楼
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tangbohejin13楼
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miaojiabing14楼
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黑曼巴Du26楼
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