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赵书生

铜虫 (初入文坛)

[求助] 将筛选的微生物接种到盆栽中的几点疑问

1,筛选出来的菌种是固氮菌,解磷菌,解钾菌。扩大培养的时候是用什么培养液? 还是用原来的还是用LB?培养时间2-3天可以么?  是不是就可以直接接种进去?

2,培养完毕如何确定细菌的数目,因为要接种到盆栽中,如果平板计数的话显然来不及,有什么比较简便易行的方法?

[ Last edited by 赵书生 on 2013-10-30 at 10:12 ]
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精彩不亮丽起落是无常
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赵书生

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 贤愚Libra at 2013-10-30 15:14:07
OD600处比色,调整为0.8-1,此时菌密度在10^8左右。

恩,之前也看到过   有没有OD值其他范围的菌密度呢?  比色前应该是混匀还是离心?
精彩不亮丽起落是无常
6楼2013-10-30 16:00:47
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yangxin9337

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
赵书生: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-10-30 10:51:28
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-10-30 21:17:51
筛选出来的菌种除固氮菌外,以芽孢杆菌为主。扩大培养时,以LB为主既可,固氮菌培养时可适当加些糖。接种时,最好离心收集菌体,缓冲液洗2-3次后用于接种比较好,可排除代谢产物和培养基的干扰。培养完细菌的数目确定,简便的方法是比色法,比较快,但要选择合适的测定波长。
2楼2013-10-30 10:48:49
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赵书生

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yangxin9337 at 2013-10-30 10:48:49
筛选出来的菌种除固氮菌外,以芽孢杆菌为主。扩大培养时,以LB为主既可,固氮菌培养时可适当加些糖。接种时,最好离心收集菌体,缓冲液洗2-3次后用于接种比较好,可排除代谢产物和培养基的干扰。培养完细菌的数目确 ...

那对于固氮菌应该用什么培养基?

离心收集和缓冲液有什么具体的方法可以参考吗?看文献里边貌似没有看到

恩,比色法得先作出曲线来吧~   


多谢~!!!
精彩不亮丽起落是无常
3楼2013-10-30 10:57:43
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yangxin9337

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
赵书生: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-10-30 16:01:15
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-10-30 21:18:07
固氮菌查一下文献,好像是YMA培养基,很常见的。缓冲液可用磷酸缓冲液(PH6。5-7。0),也可用TRIS。如用比色法,是要做一下曲线的,但后面测定就比较快了。实际上,直接镜检是最快的了。
4楼2013-10-30 12:37:48
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