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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 请教植物内生真菌筛选
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794378428

银虫 (小有名气)

[交流] 请教植物内生真菌筛选

请问各位有做过植物内生真菌筛选的吗，好筛选吗，需要注意点什么？谢谢
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1楼2011-08-12 18:54:11
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yesucao

木虫 (正式写手)
★
794378428(金币+1):谢谢参与
794378428(金币+1): 2011-08-17 14:56:09
首先要保证表面消毒彻底，要不然你怎么证明你筛选到的是内生菌呢？
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2楼2011-08-12 21:46:24
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794378428

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yesucao at 2011-08-12 21:46:24:
首先要保证表面消毒彻底，要不然你怎么证明你筛选到的是内生菌呢？

恩，这个是前提，要做对照啊。不知道有没有真菌的筛选怎么样，是不是很麻烦，呵呵，筛选还要鉴定方面的，请各位前辈说说自己的经验啊
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3楼2011-08-13 11:03:15
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yesucao

木虫 (正式写手)
794378428(金币+1): 2011-08-17 14:56:12
我还不是什么前辈嘞，这里的高手多的是，我只是筛选过内生细菌 ，真菌没有弄过，筛选工作量肯定是很大的，你是筛选大部分的内生真菌呢？，还是说想筛选其中具有某种作用的真菌？比如拮抗作用
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4楼2011-08-13 12:27:20
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794378428

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yesucao at 2011-08-13 12:27:20:
我还不是什么前辈嘞，这里的高手多的是，我只是筛选过内生细菌 ，真菌没有弄过，筛选工作量肯定是很大的，你是筛选大部分的内生真菌呢？，还是说想筛选其中具有某种作用的真菌？比如拮抗作用

是筛大部分真菌，然后判断其是否产绿原酸。绿原酸是有抗菌作用的。查了一部分文献，但是自己没有筛过菌。呵呵
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5楼2011-08-17 14:54:51
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tmhua

铁虫 (小有名气)
★
794378428(金币+1):谢谢参与
794378428(金币+1): 2011-08-20 15:00:38
其实差别于平时的分离只有表面消毒和对材料的前出来，还有不要忘记做对照。做几次就会了  筛菌效果怎样还得考平时的经验和操作技能
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6楼2011-08-17 16:22:24
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zhangguili

铁杆木虫 (正式写手)
★
794378428(金币+1):谢谢参与
794378428(金币+1): 2011-08-20 15:00:41
对分离得到的内生真菌使用合适的种子及发酵培养基进行发酵，然后用等体积无水乙醇浸泡，离心后得到粗提物。然后对该粗提物进行活性测定。如抗真菌活性就采用白色念珠菌。对有活性的菌株进行液相检测，看有没有目标化合物的吸收峰，有的话就接峰送液质检测，看有没有目标化合物的分子量。如有都有的话一般就有你要的目标化合物了。
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7楼2011-08-18 10:04:19
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794378428

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhangguili at 2011-08-18 10:04:19:
对分离得到的内生真菌使用合适的种子及发酵培养基进行发酵，然后用等体积无水乙醇浸泡，离心后得到粗提物。然后对该粗提物进行活性测定。如抗真菌活性就采用白色念珠菌。对有活性的菌株进行液相检测，看有没有目标 ...

谢谢
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8楼2011-08-20 15:01:48
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xhg207

金虫 (正式写手)
★
794378428(金币+1):谢谢参与
794378428(金币+1): 2011-08-21 07:56:12
至少注意两点：消毒时间；培养基de xuan z!
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9楼2011-08-20 19:23:35
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794378428

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by xhg207 at 2011-08-20 19:23:35:
至少注意两点：消毒时间；培养基de xuan z!

恩，是的，查过一些文献，消毒的时间都不同，流程差不多。这个看来很重要，得摸索。谢谢
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10楼2011-08-21 08:05:47
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fangxi010

禁虫 (小有名气)
★
794378428(金币+1):谢谢参与
794378428(金币+1): 2011-08-30 12:31:13
本帖内容被屏蔽
11楼2011-08-21 11:08:30
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794378428

银虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by fangxi010 at 2011-08-21 11:08:30:
跟师兄做过，消毒非常关键啊，各种污染有没有啊？长得还很慢~

谢谢
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12楼2011-08-30 12:31:22
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794378428

银虫 (小有名气)
dddddddddddddddddddddddddddddd
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13楼2011-09-01 08:49:50
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tazhongren

金虫 (正式写手)
★
794378428(金币+1):谢谢参与
次氯酸钠消毒5~8分钟，硬一点的部位（根）8分钟，软一点的（叶）5分钟足够了，太久也不好
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14楼2011-12-13 13:00:37
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shengkeyuan

铁虫 (小有名气)
★
794378428(金币+1):谢谢参与
先顶起来
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15楼2011-12-16 03:15:51
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Zoe150

金虫 (小有名气)
★
794378428(金币+1): 谢谢参与
也有用升汞消毒的。。。也有用70%乙醇消毒的
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16楼2012-05-31 11:03:32
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chenyishan

木虫 (正式写手)
★
794378428(金币+1): 谢谢参与
1、样品要消毒，次氯酸或升汞，时间1-2分钟，消完后用无菌水涮涮，无菌滤纸吸干，手术刀片切切，；
2、培养基中加链霉素和青霉素1mg/ml;接种培养，培养温度最好不要超过28摄氏度
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18楼2012-07-30 19:13:24
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sonumlhamo

新虫 (小有名气)
★
794378428(金币+1): 谢谢参与
引用回帖:
1338568楼: Originally posted by 794378428 at 2011-08-17 14:54:51
是筛大部分真菌，然后判断其是否产绿原酸。绿原酸是有抗菌作用的。查了一部分文献，但是自己没有筛过菌。呵呵...

怎么判断它有没有产绿原酸～
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19楼2012-11-22 19:38:57
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小东艳yuanyi

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
18楼: Originally posted by chenyishan at 2012-07-30 19:13:24
1、样品要消毒，次氯酸或升汞，时间1-2分钟，消完后用无菌水涮涮，无菌滤纸吸干，手术刀片切切，；
2、培养基中加链霉素和青霉素1mg/ml;接种培养，培养温度最好不要超过28摄氏度

我就是这么做的，乙醇消毒40S后，再用升汞消毒2min。不过抗生素的量我采用的是0.1g/L，效果好像也可以。
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20楼2015-01-08 10:13:15
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JOEF17楼
2012-06-01 14:16   回复  
794378428(金币+1): 谢谢参与
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