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xiaomi6621

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] HPLC保留时间的问题 已有1人参与

用的是岛津的四元低压系统,用C泵(有机相)、D泵(缓冲盐)与用D泵(有机相)、C泵(缓冲盐),在完全相同的色谱条件下分析同一种物质,保留时间差别很大,这是为什么呢?流动相比例都是一样的,只是将泵换了个位置,再者用其他的两个泵,比如A/B、A/C、A/D、D/B、C/B(前面的泵是有机相后面的是缓冲盐)所走的保留时间都是差别不大的,就是C/D差别很大,而且与前几天用C/D的保留时间相比,现在明显推迟了10几分钟,这是什么原因呢?
  不知道大家看懂了没有,还希望多多指导一下,会是比例阀的问题吗?可是C/D与D/C咋就差那么多呢?
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xiaomi6621

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by gaojcon at 2013-10-24 12:15:36
你可以用一路水,一路丙酮水溶液,在C/D 和 D/C上设置梯度运行一下,看一下梯度变换是否与设置的一致。

你是说先是C水D丙酮水,再换成D水C丙酮水,那梯度是不变的吧,就是说水和丙酮水的比例是不变的吧,那如果不一致说明什么问题?
9楼2013-10-24 12:27:19
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-10-24 10:13:47
有可能是比例阀问题,可以试着排除一下,例如:purge A管时,把其他三管路全部提出流动相页面,看看是否其他三个管路的流动相也在流动。
悲催的研发!
2楼2013-10-24 08:57:13
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天马侠客

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
问题应该出在你调换泵时,泵里的缓冲盐有残留,当你再次使用时,有机相与缓冲盐比例就发生改变,所以,保留时间就变了。
3楼2013-10-24 09:35:36
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wjg6670

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
检查各比例阀是否正常,关闭其他阀,分别走流动相,看是否正常。
4楼2013-10-24 10:05:29
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