| 查看: 1755 | 回复: 11 | |||
[求助]
槭树科DNA提取
|
|||
| 我在提取槭树科红枫的时候，DNA提不出来，或者提出来的含的杂质太多了，加了PVP和抗坏血酸去杂质，不管用，急求各给我解答，谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
江苏省优青门槛
已经有20人回复
-
心好累。今年我们部门提交了18个项目。中了11了，可惜我的又挂了
已经有10人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有263人回复
-
面上项目计划书
已经有7人回复
-
面上项目计划书附件
已经有9人回复
-
面上项目计划书系统状态
已经有18人回复
-
NSFC-UNEP（与联合国环境规划署）合作项目
已经有33人回复
-
和伊朗人合作
已经有32人回复
-
江苏省自然基金
已经有7人回复
-
生命科学新英文普刊《INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE》
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- DNA的提取和纯化
已经有11人回复
- 提取出的DNA是无色透明的还是黄白色的？
已经有15人回复
- 细菌基因组DNA提取 交流
已经有18人回复
- 乳酸菌DNA提取中的问题
已经有5人回复
- 求助——真菌DNA提取
已经有11人回复
- 基因组DNA提取问题
已经有32人回复
- 植物干样DNA提取试剂盒
已经有15人回复
- DNA的提取简介，包括法医DNA的提取方法！
已经有54人回复
- 植物DNA提取问题
已经有8人回复
- 丝状真菌提取总DNA问题
已经有14人回复
- 为什么DNA提取总降解
已经有15人回复
- 【求助/交流】提取的DNA纯度不好
已经有10人回复
- 【求助/交流】求动物组织DNA提取方法
已经有8人回复
- 【求助/交流】粪便DNA提取技术
已经有22人回复
5楼2013-10-27 10:14:45
starseacow
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +426 - APEPI: 64
- 应助: 1217 (讲师)
- 金币: 9097.3
- 散金: 16445
- 红花: 226
- 帖子: 4669
- 在线: 2320.2小时
- 虫号: 1136974
- 注册: 2010-11-02
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
- 管辖: 动植物
2楼2013-10-21 18:22:38
3楼2013-10-25 13:06:09
kkshaxqd
金虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 534.2
- 帖子: 141
- 在线: 39.7小时
- 虫号: 2664505
- 注册: 2013-09-18
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
4楼2013-10-25 20:17:24
kkshaxqd
金虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 534.2
- 帖子: 141
- 在线: 39.7小时
- 虫号: 2664505
- 注册: 2013-09-18
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
6楼2013-10-28 21:22:07
7楼2013-10-29 10:16:39
kkshaxqd
金虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 534.2
- 帖子: 141
- 在线: 39.7小时
- 虫号: 2664505
- 注册: 2013-09-18
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
8楼2013-10-29 14:49:12
kkshaxqd
金虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 534.2
- 帖子: 141
- 在线: 39.7小时
- 虫号: 2664505
- 注册: 2013-09-18
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
【答案】应助回帖
|
本试验在参照陈坤松IS2]等提取DNA的方法基础上加以改进，找到更适合含多酚 累植物叶片基因组DNA提取的方法，具体步骤如下： (1)取100mg血红鸡爪槭叶片置液氮种冷冻，研磨成粉，迅速置入盛有lml DNA 提取缓冲液1(含209／L CTAB、20 g／L聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、100mmol／L Tris—HCl (pH8．0)、25 mmol／L EDTA与2mol／LnaCl)的离心管中，再加入1％B一巯基乙醇，颠 倒混匀，置于冰浴中30min，其问不断混匀，防止样品结冻凝固于管底； (2)于4℃下以12000rpm离心lmin，弃上清，加入700pl 65预热的DNA提取 缓冲液2，加1％B．巯基乙醇，震荡混匀，于65℃水浴20min，离心10min； (3)吸取上清液于新离心管中，每管加入等体积Tris饱和酚／氯仿／异戊醇(25： 24：1)，轻轻颠倒混匀，冰上放置10min，4℃条件下12000rpm，离心10min； (4)取上清液，加等体积的氯仿／异戊醇，40c条件下12000rpm，离心10min； (5)转移上清液于另一离心管，加2／3倍体积异丙醇，轻缓颠倒混匀，室温放 置15min： (6)4。C条件下12000rpm，离心10min，去上清液； (7)加100pl的70％的无水乙醇洗涤沉淀2次，室温下微干，溶于509lTE缓冲 液； (8)加入终浓度5099／ml的RNase，37℃保温1h； (9)用等体积的氯仿／异戊醇抽提1次，12000rpm，离心10min； (10)上清液中加入O．1倍体积的Nacl，2倍体积的无水乙醇，冰箱中．20。C放置 0．5h，12000rpm，离心10min，出去上清液； (11)用70％的无水乙醇洗涤沉淀2次，自然干燥后溶于50plTE； (12)测OD值，琼脂糖凝胶电泳分析。 |
9楼2013-10-29 15:56:41
10楼2013-10-30 12:26:50
