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[交流]
生工测序重叠峰交流
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我在做表达载体（表达一段小rna全长138bp），构建后的载体热击入top10，单菌落挑出来（但是菌落太密集，可能会不小心把两个菌落增到一个区域。）。 经过筛菌，提质粒双酶切和pcr验证条带成功。然后送测序，结果生工返回的结果： 原文：“7号，19号 （使用引物 PBV220R） 测序后发现有重叠现象”，然后给了我用PBAD-F_J引物测序的结果。上blast之后结果是一个载体序列。 百思不得其解。 1：如果是重叠峰。怎么还给了一个结果。 2：如果我酶切验证的条带都出来了。怎么测序还会是空的呢。 目前自我分析结果：1可能长出来的单菌落比较密集。筛菌时候混杂了带有空载体的菌。2但是这样的话。为什么还给了结果呢？3生工靠谱吗？怎么解决呢。是不是我吧增的菌再画个4区然后再增下验证再测序呢？ 求有测序经验的朋友帮忙分析解释下吧!谢谢  测序7号19号.png [ Last edited by 沙门小rna on 2013-10-14 at 17:35 ] |
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2013-10-14 17:23:37, 343.15 K
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