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ningdongjie

新虫 (初入文坛)

[求助] 硫酸蒽酮法测玉米淀粉含量 已有3人参与

最近测玉米淀粉含量,碰到问题了,大家帮忙分析下,问题出在哪里了?
1. 葡萄糖标准液的配制  称取无水葡萄糖(AR级)0.1g溶于蒸馏水中,定容至100毫升,用前取此液10毫升,再用水稀释至100毫升。
2.. 标准曲线的绘制    取6支干洁刻度试管,依次移入葡萄糖标准液(100μg/ml)0,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00ml后,再从1至4试管依次补加1.0,0.8,0.6,0.4,0.2,0ml蒸馏水后,再分别加入蒽酮试剂5毫升,于沸水中加热10分钟,冷却后在620nm波长处比色,记录OD值,以吸光值为纵坐标,糖含量为横坐标,绘出标准曲线
3. 80%乙醇的配制    取400毫升乙醇加水定容至500ml
4. 6摩尔的盐酸  
5. 40%氢氧化钠
6. 蒽酮试剂:1克蒽酮溶于72%的H2SO4 1000ml(98%的H2SO4+240的蒸馏水),棕色瓶冰箱保存2~3周。
五   实验步骤
1. 分离出水溶性糖
0.1g样      置于离心管中     加入8毫升80%乙醇    浸提10分钟后离心5分钟     残渣再加入8ml 80%乙醇。重复三次
2. 水解
残渣用水洗入250ml三角瓶,摇匀后沸水浴加热2小时,冷却后加40%氢氧化钠中和,移入100ml容量瓶蒸馏水定容,过滤;取滤液5ml于50ml容量瓶,蒸馏水定容做为淀粉测定液。
3. 测定
取淀粉测定液1ml(空白用1ml蒸馏水代替),加入蒽酮试剂5ml,摇匀,于沸水浴中加热10分钟,冷却后在620nm波长处比色
六  结果的计算与表述
C=AN*0.9/W
C—样品淀粉含量(μg/g)         
W—样品重量(g)
A—标准曲线查得的糖量(μg)      
N—样品提取液占样品反应液的倍数
我这样测定的结果偏高很多,玉米82%,可溶性淀粉112%,不清楚是什么原因造成的,大家分析下,问题出在哪里,是不是样品处理的方法不对,还是标准曲线的问题,因为曲线方程稍有变动结果就会差很多。
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信条

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这个应该是离心后上清液没有取出干净的原因
6楼2014-04-23 22:11:19
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小张cc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你说的水解是用的6mol/l的盐酸水解过的?
要努力啊!
2楼2013-10-06 10:33:03
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ningdongjie

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小张cc at 2013-10-06 10:33:03
你说的水解是用的6mol/l的盐酸水解过的?

对,是用6MOL/L的盐酸
3楼2013-10-11 09:56:20
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小张cc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你水解后用此法测的是总糖(或者说是还原糖)吧,是不是还得换算成淀粉
要努力啊!
4楼2013-10-11 10:59:46
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