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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 硫酸蒽酮法测玉米淀粉含量
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ningdongjie

新虫 (初入文坛)

[求助] 硫酸蒽酮法测玉米淀粉含量 已有3人参与

最近测玉米淀粉含量，碰到问题了，大家帮忙分析下，问题出在哪里了？
1. 葡萄糖标准液的配制  称取无水葡萄糖（AR级）0.1g溶于蒸馏水中，定容至100毫升，用前取此液10毫升，再用水稀释至100毫升。
2.. 标准曲线的绘制    取6支干洁刻度试管，依次移入葡萄糖标准液（100μg/ml）0，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00ml后，再从1至4试管依次补加1.0，0.8，0.6，0.4，0.2，0ml蒸馏水后，再分别加入蒽酮试剂5毫升，于沸水中加热10分钟，冷却后在620nm波长处比色，记录OD值，以吸光值为纵坐标，糖含量为横坐标，绘出标准曲线
3. 80%乙醇的配制    取400毫升乙醇加水定容至500ml
4. 6摩尔的盐酸  
5. 40%氢氧化钠
6. 蒽酮试剂：1克蒽酮溶于72%的H2SO4 1000ml(98%的H2SO4+240的蒸馏水)，棕色瓶冰箱保存2~3周。
五   实验步骤
1. 分离出水溶性糖
0.1g样      置于离心管中     加入8毫升80%乙醇    浸提10分钟后离心5分钟     残渣再加入8ml 80%乙醇。重复三次
2. 水解
残渣用水洗入250ml三角瓶，摇匀后沸水浴加热2小时，冷却后加40%氢氧化钠中和，移入100ml容量瓶蒸馏水定容，过滤；取滤液5ml于50ml容量瓶，蒸馏水定容做为淀粉测定液。
3. 测定
取淀粉测定液1ml（空白用1ml蒸馏水代替），加入蒽酮试剂5ml，摇匀，于沸水浴中加热10分钟，冷却后在620nm波长处比色
六  结果的计算与表述
C=AN*0.9/W
C—样品淀粉含量（μg/g）         
W—样品重量（g）
A—标准曲线查得的糖量（μg）      
N—样品提取液占样品反应液的倍数
我这样测定的结果偏高很多，玉米82%,可溶性淀粉112%，不清楚是什么原因造成的，大家分析下，问题出在哪里，是不是样品处理的方法不对，还是标准曲线的问题，因为曲线方程稍有变动结果就会差很多。
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1楼 2013-10-05 09:48:11
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小张cc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你说的水解是用的6mol/l的盐酸水解过的？
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要努力啊！
2楼2013-10-06 10:33:03
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ningdongjie

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小张cc at 2013-10-06 10:33:03
你说的水解是用的6mol/l的盐酸水解过的？

对，是用6MOL/L的盐酸
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3楼2013-10-11 09:56:20
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小张cc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你水解后用此法测的是总糖（或者说是还原糖）吧，是不是还得换算成淀粉
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要努力啊！
4楼2013-10-11 10:59:46
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qiameng90

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
5楼2014-04-17 17:34:45
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信条

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这个应该是离心后上清液没有取出干净的原因
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6楼2014-04-23 22:11:19
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钢铁汉子

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小张cc at 2013-10-11 10:59:46
你水解后用此法测的是总糖（或者说是还原糖）吧，是不是还得换算成淀粉

6M/L HCL 具体问题出在哪里？这个浓度可是09年食品的国标。球联系方式。想向你继续请教
赞一下(1人) 回复此楼
有些路总要有人走，就算工作再忙，也不要忘记生活的情趣。人生有限，活在当下，大家开心！
7楼2014-09-27 12:01:56
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钢铁汉子

铁杆木虫 (著名写手)
我们也遇到了测高的问题，请问楼主问题解决了吗？是怎么解决的？
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有些路总要有人走，就算工作再忙，也不要忘记生活的情趣。人生有限，活在当下，大家开心！
8楼2014-09-27 12:03:18
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杜小好

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

水解完淀粉之后，应该考虑一下除杂质，有蛋白质什么的，还有脂类物质，国标方法上也写着要清除杂质啊
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9楼2014-10-08 15:17:36
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钢铁汉子

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ningdongjie at 2013-10-11 09:56:20
对，是用6MOL/L的盐酸...

6M/L HCL 具体问题出在哪里？这个浓度可是09年食品的国标。球联系方式。想向你继续请教
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有些路总要有人走，就算工作再忙，也不要忘记生活的情趣。人生有限，活在当下，大家开心！
10楼2014-10-09 10:44:28
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