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硫酸蒽酮法测玉米淀粉含量 已有3人参与
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最近测玉米淀粉含量，碰到问题了，大家帮忙分析下，问题出在哪里了？ 1. 葡萄糖标准液的配制 称取无水葡萄糖（AR级）0.1g溶于蒸馏水中，定容至100毫升，用前取此液10毫升，再用水稀释至100毫升。 2.. 标准曲线的绘制 取6支干洁刻度试管，依次移入葡萄糖标准液（100μg/ml）0，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00ml后，再从1至4试管依次补加1.0，0.8，0.6，0.4，0.2，0ml蒸馏水后，再分别加入蒽酮试剂5毫升，于沸水中加热10分钟，冷却后在620nm波长处比色，记录OD值，以吸光值为纵坐标，糖含量为横坐标，绘出标准曲线 3. 80%乙醇的配制 取400毫升乙醇加水定容至500ml 4. 6摩尔的盐酸 5. 40%氢氧化钠 6. 蒽酮试剂：1克蒽酮溶于72%的H2SO4 1000ml(98%的H2SO4+240的蒸馏水)，棕色瓶冰箱保存2~3周。 五 实验步骤 1. 分离出水溶性糖 0.1g样 置于离心管中 加入8毫升80%乙醇 浸提10分钟后离心5分钟 残渣再加入8ml 80%乙醇。重复三次 2. 水解 残渣用水洗入250ml三角瓶，摇匀后沸水浴加热2小时，冷却后加40%氢氧化钠中和，移入100ml容量瓶蒸馏水定容，过滤；取滤液5ml于50ml容量瓶，蒸馏水定容做为淀粉测定液。 3. 测定 取淀粉测定液1ml（空白用1ml蒸馏水代替），加入蒽酮试剂5ml，摇匀，于沸水浴中加热10分钟，冷却后在620nm波长处比色 六 结果的计算与表述 C=AN*0.9/W C—样品淀粉含量（μg/g） W—样品重量（g） A—标准曲线查得的糖量（μg） N—样品提取液占样品反应液的倍数 我这样测定的结果偏高很多，玉米82%,可溶性淀粉112%，不清楚是什么原因造成的，大家分析下，问题出在哪里，是不是样品处理的方法不对，还是标准曲线的问题，因为曲线方程稍有变动结果就会差很多。 |
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5楼2014-04-17 17:34:45
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