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嘟嘟才靖

铜虫 (小有名气)

[求助] HPLC请问为什么这两个怎么都分不开啊

这两个标准品  我用30%甲醇、2%甲醇,2%乙腈、纯水 结果保留时间总是几乎一样呢
柱子是
C18AQ
流速1.0试过  0.5也试过都不行
HPLC请问为什么这两个怎么都分不开啊
图片1.png


HPLC请问为什么这两个怎么都分不开啊-1
图片2.png

[ Last edited by 嘟嘟才靖 on 2013-8-29 at 08:51 ]
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woniubaby

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这个化合物的羟基较多,用AQ柱原本是很好的,但是出现这种情况,可以考虑换一根普通的C18柱,然后用乙腈/甲醇和家TFA的水溶液,走一个类似5%-95%(B%)的梯度,看看是什么情况,应该会有所改善的

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Doing what you like is freedom, liking what you do is happiness.
6楼2013-08-30 07:57:56
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普通回帖

angie_lee

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
试试离子对试剂呢,加点盐之类  调节一下PH值。同学你流动相试的还不够啊,然后还可以试试梯度洗脱。
2楼2013-08-29 09:35:47
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czfscf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
走个梯度 20:80——40:60  水:甲醇或者乙腈
Ecological Genomics;the scientific walking hormone
3楼2013-08-29 10:02:10
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j115090587

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
考虑换柱子吧,你这个流动相变化出峰时间变化大码?
4楼2013-08-29 16:58:23
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
换个柱子吧 试试苯基柱行不行
5楼2013-08-29 21:05:29
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嘟嘟才靖

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by woniubaby at 2013-08-30 07:57:56
你这个化合物的羟基较多,用AQ柱原本是很好的,但是出现这种情况,可以考虑换一根普通的C18柱,然后用乙腈/甲醇和家TFA的水溶液,走一个类似5%-95%(B%)的梯度,看看是什么情况,应该会有所改善的

谢谢建议 我想尝试一下  之前流动相没有变化的情况下  我用过C18  效果不好 我想听取您的建议  加TFA 用C18柱子试试  但是请问具体TFA浓度怎么控制???需要调PH在什么范围呢 谢谢
7楼2013-08-30 09:50:44
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嘟嘟才靖

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lifucheng at 2013-08-29 21:05:29
换个柱子吧 试试苯基柱行不行

好谢谢  实验室正好有 试试看
8楼2013-08-30 09:58:32
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yankunsu

金虫 (正式写手)

也可以试试氨基柱,或调下PH值,
9楼2013-08-30 15:13:57
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嘟嘟才靖

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by yankunsu at 2013-08-30 15:13:57
也可以试试氨基柱,或调下PH值,

那请问调节PH有什么具体建议??谢谢
10楼2013-08-30 15:50:54
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