应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 蛋白质SDS-丙烯酰胺凝胶电泳 连mark都没有跑动
51/1返回列表
查看: 2424  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

123彭好好

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质SDS-丙烯酰胺凝胶电泳 连mark都没有跑动

我利用不同的溶液提取了蛋清中的几种不同溶性的蛋白质，进行了两次电泳，全都失败了。所有的点样及mark都没有动，在63V电压下跑了2个多小时。样品没有经过透析处理，就直接和样品缓冲液混合煮沸了5分钟，就开始点样了。不知道具体的问题出在哪里，让我的实验没有办法正常进行，希望能有人帮我解答！！
以下是我所用的胶的配方：
10%分离胶：
水                                     1.9ml
1.5mol/l Tris-Hcl(PH=8.8)   1ml
30%丙烯酰胺                    1.7ml
10%SDS                            50μl
10%AP                               50μl
TEMED                               2μL

浓缩胶：
水                                     1.4ml
1.5mol/l Tris-Hcl(PH=6.8)   0.25ml
30%丙烯酰胺                    0.33ml
10%SDS                            20μl
10%AP                               20μl
TEMED                               2μL
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-08-16 08:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

396101466

金虫 (正式写手)

一段遗失的美好

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
123彭好好: 金币+1, ★有帮助 2013-08-20 17:59:51
首先，如果电源接反了，溴酚蓝会从上面溢出，电极缓冲液会变成蓝色；
第二，在电泳过程中溴酚蓝的指示作用比较重要，如果有电流通过的话，溴酚蓝会随着电流向下跑的，如果溴酚蓝没有动，说明胶片中都没通电，根据这个你可以找下原因，没有PAGE胶片无法做进一步分析！
赞一下 回复此楼
人生的三大悲剧：不知道选择，不坚持选择，不断选择！
9楼2013-08-16 18:43:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

windygo

木虫 (正式写手)

咸蛋超人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
123彭好好: 金币+1, ★有帮助 2013-08-20 17:58:59
楼主别着急，先看是否你的电泳槽正负极接反了；
如果都好着的话，那就看下自己的其他东西有没有配错，比如说电极缓冲液等。
赞一下 回复此楼
我已经开始怀念那些人，那些事了~
2楼2013-08-16 09:48:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

123彭好好

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by windygo at 2013-08-16 09:48:13
楼主别着急，先看是否你的电泳槽正负极接反了；
如果都好着的话，那就看下自己的其他东西有没有配错，比如说电极缓冲液等。

电极是没有接反的，我用的电极缓冲配方是：
Tris              3.02g
甘氨酸          14.4g
SDS               1g
水                  1L
我觉得问题应该不出在这里吧？
赞一下 回复此楼
3楼2013-08-16 12:03:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnymen

银虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
hsd3521: 应助指数-1, 非有效应助 2013-08-17 10:20:50
63V电压，怎么选择这个电压，奇怪
赞一下 回复此楼
4楼2013-08-16 16:31:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 293求调剂 +6 zjl的号 2026-03-16 11/550 2026-03-17 14:27 by houyaoxu
[考研] 085600材料与化工 +4 安全上岸！ 2026-03-16 4/200 2026-03-17 14:02 by 勇敢太监王公公
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +15 不知道叫什么！ 2026-03-15 17/850 2026-03-17 10:13 by Sammy2
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭