24小时热门版块排行榜    

查看: 2779  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

123彭好好

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质SDS-丙烯酰胺凝胶电泳 连mark都没有跑动

我利用不同的溶液提取了蛋清中的几种不同溶性的蛋白质,进行了两次电泳,全都失败了。所有的点样及mark都没有动,在63V电压下跑了2个多小时。样品没有经过透析处理,就直接和样品缓冲液混合煮沸了5分钟,就开始点样了。不知道具体的问题出在哪里,让我的实验没有办法正常进行,希望能有人帮我解答!!
以下是我所用的胶的配方:
10%分离胶:
水                                     1.9ml
1.5mol/l Tris-Hcl(PH=8.8)   1ml
30%丙烯酰胺                    1.7ml
10%SDS                            50μl
10%AP                               50μl
TEMED                               2μL

浓缩胶:
水                                     1.4ml
1.5mol/l Tris-Hcl(PH=6.8)   0.25ml
30%丙烯酰胺                    0.33ml
10%SDS                            20μl
10%AP                               20μl
TEMED                               2μL
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnymen

银虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
hsd3521: 应助指数-1, 非有效应助 2013-08-17 10:20:50
63V电压,怎么选择这个电压,奇怪
4楼2013-08-16 16:31:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

windygo

木虫 (正式写手)

咸蛋超人

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
123彭好好: 金币+1, 有帮助 2013-08-20 17:58:59
楼主别着急,先看是否你的电泳槽正负极接反了;
如果都好着的话,那就看下自己的其他东西有没有配错,比如说电极缓冲液等。
我已经开始怀念那些人,那些事了~
2楼2013-08-16 09:48:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

123彭好好

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by windygo at 2013-08-16 09:48:13
楼主别着急,先看是否你的电泳槽正负极接反了;
如果都好着的话,那就看下自己的其他东西有没有配错,比如说电极缓冲液等。

电极是没有接反的,我用的电极缓冲配方是:
Tris              3.02g
甘氨酸          14.4g
SDS               1g
水                  1L
我觉得问题应该不出在这里吧?
3楼2013-08-16 12:03:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnymen

银虫 (正式写手)

hsd3521: 屏蔽内容, 不支持QQ群宣传 2013-08-17 10:21:08
本帖内容被屏蔽

5楼2013-08-16 16:33:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[论文投稿] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-24 21:59 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见