24小时热门版块排行榜    

查看: 2425  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

123彭好好

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质SDS-丙烯酰胺凝胶电泳 连mark都没有跑动

我利用不同的溶液提取了蛋清中的几种不同溶性的蛋白质,进行了两次电泳,全都失败了。所有的点样及mark都没有动,在63V电压下跑了2个多小时。样品没有经过透析处理,就直接和样品缓冲液混合煮沸了5分钟,就开始点样了。不知道具体的问题出在哪里,让我的实验没有办法正常进行,希望能有人帮我解答!!
以下是我所用的胶的配方:
10%分离胶:
水                                     1.9ml
1.5mol/l Tris-Hcl(PH=8.8)   1ml
30%丙烯酰胺                    1.7ml
10%SDS                            50μl
10%AP                               50μl
TEMED                               2μL

浓缩胶:
水                                     1.4ml
1.5mol/l Tris-Hcl(PH=6.8)   0.25ml
30%丙烯酰胺                    0.33ml
10%SDS                            20μl
10%AP                               20μl
TEMED                               2μL
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

123彭好好

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by windygo at 2013-08-16 09:48:13
楼主别着急,先看是否你的电泳槽正负极接反了;
如果都好着的话,那就看下自己的其他东西有没有配错,比如说电极缓冲液等。

电极是没有接反的,我用的电极缓冲配方是:
Tris              3.02g
甘氨酸          14.4g
SDS               1g
水                  1L
我觉得问题应该不出在这里吧?
3楼2013-08-16 12:03:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

windygo

木虫 (正式写手)

咸蛋超人

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
123彭好好: 金币+1, 有帮助 2013-08-20 17:58:59
楼主别着急,先看是否你的电泳槽正负极接反了;
如果都好着的话,那就看下自己的其他东西有没有配错,比如说电极缓冲液等。
我已经开始怀念那些人,那些事了~
2楼2013-08-16 09:48:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnymen

银虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
hsd3521: 应助指数-1, 非有效应助 2013-08-17 10:20:50
63V电压,怎么选择这个电压,奇怪
4楼2013-08-16 16:31:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnymen

银虫 (正式写手)

hsd3521: 屏蔽内容, 不支持QQ群宣传 2013-08-17 10:21:08
本帖内容被屏蔽

5楼2013-08-16 16:33:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 070300化学319求调剂 +4 锦鲤0909 2026-03-17 4/200 2026-03-17 18:21 by 重科小霸王
[考研] 材料专硕306英一数二 +7 z1z2z3879 2026-03-16 9/450 2026-03-17 17:31 by ccjequ
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +5 薛云鹏 2026-03-13 5/250 2026-03-17 10:15 by Sammy2
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[基金申请] 有必要更换申报口吗 20+3 fannyamoy 2026-03-11 3/150 2026-03-14 00:52 by zhanghaozhu
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +3 zjy101327 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:48 by JourneyLucky
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
信息提示
请填处理意见