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湿法转膜转不上去。
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| 蛋白分子量约20-25KD,湿法转膜,北京六一的转膜仪,ferment的marker但转不上去,marker和目的蛋白都转不上去。150mA2-2.5小时,转后的胶胶考马斯亮蓝染色,是空白。求助! |
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2楼2013-08-06 16:26:11
jiang701820
银虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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| 胶上还有marker么?如果胶上也没有marker了说明你正负极插反了,蛋白全部转到滤纸上去了;另外你把电流调到150mA的时候电压是多少?转膜液(3.03g trisbase,14.4g 甘氨酸,200ml甲醇,加超纯水至1L)是否配错?如果这些都没问题的话可能你转膜的时候三明治没做好。另外,20-25kda不需要转那么长时间,我们一般200mA(2块胶)转1个小时,大一点的就转1个半小时,超过200kda转2个小时,一般都没有问题。good luck! |
3楼2013-08-06 23:23:08
4楼2013-08-10 11:58:26
bullfrog325
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5楼2013-08-10 19:43:22







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