应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
381/1返回列表
查看: 5508  |  回复: 37
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xiaoxia110

木虫 (正式写手)

[交流] DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件

DNA电泳，Mark拖尾，并且跑不开，各种原因排除，还是没解决
（1）怀疑琼脂糖有问题，由原来的西班牙牌子，换了sigma的，还是一样结果。
（2）有4个电泳仪电源，三个电泳槽，不同搭配，结果还是一样
（3）怀疑染色液gelred,又买了新的，一样结果
（4）电泳液有问题，配了几次，精密调pH值，结果还是一样
（5）怀疑实验室电压有问题，用万能表一测没问题，并且换到其他房间跑电压，还是一样结果。
（6）电压从正常，到高电压不停调试，一样结果
（7）拿自己配好的胶及缓冲液，到其他实验室跑，第一次还行，到后面几次也跑的不好。
（8）Mark也没问题，都是新买的。

附件都是类似的电泳结果，所有的条件都换过了，除了配TAE的Tris,冰乙酸，EDTA之外。至今没解决，大家开玩笑说：实验室灵异事件。

希望大家能提出好意见，帮忙解决这个问题。
DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件
001.jpg


DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件-1
002.jpg


DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件-2
003.jpg


DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件-3
004.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验 实验求助

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-08-03 20:37:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

672234993

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我最近也是遇到同样的问题，头疼。。。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2013-08-04 09:40:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yeelng

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我遇见过一摸一样的问题，用gelred染料或造成拖尾，gelred分子量大，和DNA结合不充分，影响DNA在电泳中的迁移效率。不知道你的染料是加在胶里还是泡好后泡染的，看样子应该是加胶里跑的电泳，建议换SBYR green染料
1,2分别是gelred和SYBR green的染料（加胶里面），还有方法是泡染或者是把gelred加在loading里和样品混一起，前者费时费力，后者定量不准确
赞一下(1人) 回复此楼
22楼2013-08-05 15:34:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小乖_1990

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是不是你的胶没完全凝啊，都是中间不行。。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
31楼2013-08-06 13:26:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Tporker

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小分子的条带比较规整，大分子的有扫帚尾巴，应该是制胶不够均匀，我们都是沸腾以后，拿出来摇匀，重复三次。另外也可能是你的拔梳子的时候过快，导致上样孔不规整，慢点拔用力两边均匀，电泳前检查上样孔是不是有碎胶。有的话可以先空跑十分钟，然后再上样。
赞一下(1人) 回复此楼
32楼2013-08-06 13:59:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windycui

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主，我原来在别的地用syb green,从来没有marker拖尾现象，到了这边用gelred，marker一直拖尾，换了胶，换了缓冲液，甚至换了配缓冲液的水，还是不行。我觉得楼上一位虫友说的对，可能是染料的问题
赞一下(1人) 回复此楼
33楼2013-08-06 17:09:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sthunder

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-03 22:12:47
看你最后一张中间那条带还可以，呵呵! 建议将溶胶的时候，多打1 min，让其彻底溶解！同时你看跑胶条件，也检测一下mark是否有问题，你们实验室其他人用同样mark是否有同样结果。Good luck！
赞一下 回复此楼
3楼2013-08-03 21:41:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyang636

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
去别的实验室借个好用的marker，
回来跑的时候，只点2ul，不要多点，跑跑看
赞一下 回复此楼
4楼2013-08-03 22:49:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whui

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Millipore水彻底清洗电泳槽和梳子；新制电泳液和胶；降低电压(60V或以下，具体根据仪器定）
赞一下 回复此楼
5楼2013-08-04 01:07:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天地沙鸥123

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
总感觉你的电压不稳定
赞一下 回复此楼
6楼2013-08-04 08:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

堍仔

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
根据我跑胶的经验哈，我觉得你电压可能大了，你试着调小点试试？
赞一下 回复此楼
7楼2013-08-04 09:29:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxia110

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 堍仔 at 2013-08-04 09:29:05
根据我跑胶的经验哈，我觉得你电压可能大了，你试着调小点试试？

你是设多少V/cm? 电泳仪电源是按5V/cm设的，两铂丝之间16cm,设电压80V,但用万能表测了下电泳槽内，两铂丝处液面的电压也就60多伏，与预设定的电压少十几左右，电压应该不大啊！
赞一下 回复此楼
9楼2013-08-04 10:01:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxia110

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by whui at 2013-08-04 01:07:45
Millipore水彻底清洗电泳槽和梳子；新制电泳液和胶；降低电压(60V或以下，具体根据仪器定）

你是用什么水配的？是去离子水吗？
赞一下 回复此楼
10楼2013-08-04 10:03:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxia110

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gaoyang636 at 2013-08-03 22:49:53
去别的实验室借个好用的marker，
回来跑的时候，只点2ul，不要多点，跑跑看

Mark都是新的，而且是各种不同分子量的Mark都这样
赞一下 回复此楼
11楼2013-08-04 10:04:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxia110

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Sthunder at 2013-08-03 21:41:53
看你最后一张中间那条带还可以，呵呵! 建议将溶胶的时候，多打1 min，让其彻底溶解！同时你看跑胶条件，也检测一下mark是否有问题，你们实验室其他人用同样mark是否有同样结果。Good luck！

样品的话，质粒一般都是一条带，很均匀，但PCR产物和Mark拖尾严重，Mark一般前3条带还行，后面的就不行。
赞一下 回复此楼
12楼2013-08-04 10:08:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

懒洋洋羊吃草

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
让别人操作一下，看看是不是操作的原因
赞一下 回复此楼
13楼2013-08-04 11:02:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

堍仔

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by xiaoxia110 at 2013-08-04 10:01:53
你是设多少V/cm? 电泳仪电源是按5V/cm设的，两铂丝之间16cm,设电压80V,但用万能表测了下电泳槽内，两铂丝处液面的电压也就60多伏，与预设定的电压少十几左右，电压应该不大啊！...

我们实验室都是跑200V的，你试试电泳的时候跑大点，时间短点呢？
赞一下 回复此楼
14楼2013-08-04 12:58:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

857136129

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
感觉可能是你的缓冲液pH的问题，因为随着缓冲液跑胶次数的增多，其pH会发生变话，进而影响电泳的结果，你可以试下换下新的缓冲液。
赞一下 回复此楼
15楼2013-08-04 13:22:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whui

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by xiaoxia110 at 2013-08-04 10:03:03
你是用什么水配的？是去离子水吗？...

Millipore水
回复此楼
16楼2013-08-05 00:08:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxia110

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 懒洋洋羊吃草 at 2013-08-04 11:02:31
让别人操作一下，看看是不是操作的原因

整个实验室，大家都跑成这样。
赞一下 回复此楼
17楼2013-08-05 08:43:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxia110

木虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 堍仔 at 2013-08-04 12:58:37
我们实验室都是跑200V的，你试试电泳的时候跑大点，时间短点呢？...

那你的电泳槽多长的？是大型的？这么高，胶会很烫啊
赞一下 回复此楼
18楼2013-08-05 08:45:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

莓林塔

木虫 (小有名气)
果然很灵异。。。
回复此楼
19楼2013-08-05 09:21:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

堍仔

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
18楼: Originally posted by xiaoxia110 at 2013-08-05 08:45:42
那你的电泳槽多长的？是大型的？这么高，胶会很烫啊...

这个我还真没量过，不过我们实验室跑胶的比别人的是大点
赞一下 回复此楼
20楼2013-08-05 09:41:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ericyo918

至尊木虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我记得拖尾是盐离子浓度的问题，记不清了，你查下，有相关拖尾的解决方案
赞一下 回复此楼
21楼2013-08-05 09:57:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaofu

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是不是marker放置时间过长？
赞一下 回复此楼
23楼2013-08-05 15:50:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mmz123250

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
简单：
marker问题、琼脂糖凝胶、电泳液问题。
1、用自己的Marker，用别人的琼脂糖胶、电泳仪、电泳条件、点样方法，跑跑看？
2、自己的琼脂糖，别人的溶胶条件，别人的marker、琼脂糖胶、电泳仪、电泳条件、点样方法，跑一个？
3、用别人的电泳液试一个
1、2、3都不行的话，就只有采用第4种方式了，什么都用别人的，自己去跑一个，确定不是人品问题。
赞一下 回复此楼
24楼2013-08-05 16:21:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loudbing

禁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
25楼2013-08-05 16:24:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loudbing

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
26楼2013-08-05 16:25:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosafety

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一看就是缓冲液的问题，主要是PH值不对。
赞一下 回复此楼
27楼2013-08-05 19:47:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxia110

木虫 (正式写手)
引用回帖:
27楼: Originally posted by biosafety at 2013-08-05 19:47:04
一看就是缓冲液的问题，主要是PH值不对。

PH也测过了，你的ph调到多少？
赞一下 回复此楼
28楼2013-08-05 19:54:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beautybanana

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个问题似乎电泳的电压过大了，不知道你用的电压是多少，我觉得100V左右就可以了，稍小的都可以，这样跑的条带一般不会出现弯弯的模样，对于电泳液，原始的TAE或TBE，10倍稀释，用一般的纯净水就可以了，调pH什么的都可以不用了，我做电泳，电泳液随便稀释随便倒到电泳槽里就可以了，Marker 要是有分不开的，可能是你用的浓度大了（取样太多，要么这Marker就是过期的货，不要以为新买的就是好货），你的第4张图片条带怎么还有红色的东西？琼脂糖加电泳液多煮沸几次，这样更均匀些。这简单的实验怎搞成这样？
赞一下 回复此楼
29楼2013-08-05 21:53:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwb95599

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
胶的浓度和缓冲夜的浓度是否是一样的?如果差别太大,是会跑成这样子的
赞一下 回复此楼
30楼2013-08-06 12:20:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxia110

木虫 (正式写手)
引用回帖:
22楼: Originally posted by yeelng at 2013-08-05 15:34:24
我遇见过一摸一样的问题，用gelred染料或造成拖尾，gelred分子量大，和DNA结合不充分，影响DNA在电泳中的迁移效率。不知道你的染料是加在胶里还是泡好后泡染的，看样子应该是加胶里跑的电泳，建议换SBYR green染料
...

最后发现确实是gelred的问题，将gelred与样品混合后再跑电泳，Marker分开了，每根条带很清楚，没拖尾！
赞一下 回复此楼
34楼2013-08-13 08:42:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxia110

木虫 (正式写手)
引用回帖:
33楼: Originally posted by windycui at 2013-08-06 17:09:08
楼主，我原来在别的地用syb green,从来没有marker拖尾现象，到了这边用gelred，marker一直拖尾，换了胶，换了缓冲液，甚至换了配缓冲液的水，还是不行。我觉得楼上一位虫友说的对，可能是染料的问题

确实是gelred问题，先将gelred与marker混合，再跑电泳，就没有拖尾现象。
赞一下 回复此楼
35楼2013-08-13 08:44:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冷眼倦天涯

金虫 (小有名气)
Good luck！
回复此楼
36楼2013-08-13 12:56:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windycui

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
35楼: Originally posted by xiaoxia110 at 2013-08-13 08:44:19
确实是gelred问题，先将gelred与marker混合，再跑电泳，就没有拖尾现象。...

请问楼主，是在点样时把gelred加进去吗？那大概加多少呢？能出来清晰的条带吗？从来没有试过这样加的，我们是把gelred加入胶里，35ml的1.2%的琼脂糖凝胶只加1微升的gelred啊
赞一下 回复此楼
37楼2013-08-13 15:03:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sinky熹

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
虽然是老帖，但我们实验室最近也出现这个情况，，之前用的GEl red没这个问题，换了另一家公司卖的gelred一直跑出来拖尾，marker也拖尾，我们是制胶的时候加进去的，100ml加10uL，请问怎样加在产物里？比例？加完要不要放置一会？
赞一下 回复此楼
38楼2014-07-02 13:30:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
xianzhi20102楼
2013-08-03 21:02   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiaoxia110 的主题更新
381/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311（085601）求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 一志愿北化085600材料专硕275|有文章专利｜求调剂 +7 Micky11223 2026-03-25 7/350 2026-03-28 18:34 by 无际的草原
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +5 niko- 2026-03-27 5/250 2026-03-28 14:25 by 唐沐儿
[考研] 317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求调剂 +6 芋泥小铃铛 2026-03-28 6/300 2026-03-28 14:15 by Ainin_
[考研] 329求调剂 +6 星野? 2026-03-26 6/300 2026-03-28 14:14 by 唐沐儿
[考研] 321求调剂 +6 材料cailiao 2026-03-21 6/300 2026-03-28 13:14 by 唐沐儿
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +6 脚滑的守法公民 2026-03-27 6/300 2026-03-28 11:02 by gjlllb
[考研] 277跪求调剂 +5 1915668 2026-03-27 9/450 2026-03-28 09:58 by zhshch
[考研] 化学调剂 +4 爱吃番茄的旭 2026-03-24 5/250 2026-03-27 17:50 by kiokin
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 机械学硕310分，数一英一，一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。，。，。，。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 300分，材料，求调剂，英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[考研] 070300，一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭