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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件
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xiaoxia110

木虫 (正式写手)

[交流] DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件

DNA电泳，Mark拖尾，并且跑不开，各种原因排除，还是没解决
（1）怀疑琼脂糖有问题，由原来的西班牙牌子，换了sigma的，还是一样结果。
（2）有4个电泳仪电源，三个电泳槽，不同搭配，结果还是一样
（3）怀疑染色液gelred,又买了新的，一样结果
（4）电泳液有问题，配了几次，精密调pH值，结果还是一样
（5）怀疑实验室电压有问题，用万能表一测没问题，并且换到其他房间跑电压，还是一样结果。
（6）电压从正常，到高电压不停调试，一样结果
（7）拿自己配好的胶及缓冲液，到其他实验室跑，第一次还行，到后面几次也跑的不好。
（8）Mark也没问题，都是新买的。

附件都是类似的电泳结果，所有的条件都换过了，除了配TAE的Tris,冰乙酸，EDTA之外。至今没解决，大家开玩笑说：实验室灵异事件。

希望大家能提出好意见，帮忙解决这个问题。
DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件
001.jpg


DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件-1
002.jpg


DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件-2
003.jpg


DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件-3
004.jpg
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1楼 2013-08-03 20:37:24
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xiaoxia110

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 堍仔 at 2013-08-04 09:29:05
根据我跑胶的经验哈，我觉得你电压可能大了，你试着调小点试试？

你是设多少V/cm? 电泳仪电源是按5V/cm设的，两铂丝之间16cm,设电压80V,但用万能表测了下电泳槽内，两铂丝处液面的电压也就60多伏，与预设定的电压少十几左右，电压应该不大啊！
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9楼2013-08-04 10:01:53
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Sthunder

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-03 22:12:47
看你最后一张中间那条带还可以，呵呵! 建议将溶胶的时候，多打1 min，让其彻底溶解！同时你看跑胶条件，也检测一下mark是否有问题，你们实验室其他人用同样mark是否有同样结果。Good luck！
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3楼2013-08-03 21:41:53
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gaoyang636

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
去别的实验室借个好用的marker，
回来跑的时候，只点2ul，不要多点，跑跑看
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4楼2013-08-03 22:49:53
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whui

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Millipore水彻底清洗电泳槽和梳子；新制电泳液和胶；降低电压(60V或以下，具体根据仪器定）
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5楼2013-08-04 01:07:45
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