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xiaoxia110

木虫 (正式写手)


[交流] DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件

DNA电泳,Mark拖尾,并且跑不开,各种原因排除,还是没解决
(1)怀疑琼脂糖有问题,由原来的西班牙牌子,换了sigma的,还是一样结果。
(2)有4个电泳仪电源,三个电泳槽,不同搭配,结果还是一样
(3)怀疑染色液gelred,又买了新的,一样结果
(4)电泳液有问题,配了几次,精密调pH值,结果还是一样
(5)怀疑实验室电压有问题,用万能表一测没问题,并且换到其他房间跑电压,还是一样结果。
(6)电压从正常,到高电压不停调试,一样结果
(7)拿自己配好的胶及缓冲液,到其他实验室跑,第一次还行,到后面几次也跑的不好。
(8)Mark也没问题,都是新买的。

附件都是类似的电泳结果,所有的条件都换过了,除了配TAE的Tris,冰乙酸,EDTA之外。至今没解决,大家开玩笑说:实验室灵异事件。

希望大家能提出好意见,帮忙解决这个问题。
DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件
001.jpg


DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件-1
002.jpg


DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件-2
003.jpg


DNA电泳 Mark拖尾 分不开 实验室灵异事件-3
004.jpg
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个问题似乎电泳的电压过大了,不知道你用的电压是多少,我觉得100V左右就可以了,稍小的都可以,这样跑的条带一般不会出现弯弯的模样,对于电泳液,原始的TAE或TBE,10倍稀释,用一般的纯净水就可以了,调pH什么的都可以不用了,我做电泳,电泳液随便稀释随便倒到电泳槽里就可以了,Marker 要是有分不开的,可能是你用的浓度大了(取样太多,要么这Marker就是过期的货,不要以为新买的就是好货),你的第4张图片条带怎么还有红色的东西?琼脂糖加电泳液多煮沸几次,这样更均匀些。这简单的实验怎搞成这样?
29楼2013-08-05 21:53:36
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Sthunder

木虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-03 22:12:47
看你最后一张中间那条带还可以,呵呵! 建议将溶胶的时候,多打1 min,让其彻底溶解!同时你看跑胶条件,也检测一下mark是否有问题,你们实验室其他人用同样mark是否有同样结果。Good luck!
3楼2013-08-03 21:41:53
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gaoyang636

木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
去别的实验室借个好用的marker,
回来跑的时候,只点2ul,不要多点,跑跑看
4楼2013-08-03 22:49:53
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whui

至尊木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
Millipore水彻底清洗电泳槽和梳子;新制电泳液和胶;降低电压(60V或以下,具体根据仪器定)
5楼2013-08-04 01:07:45
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