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fushxmy

金虫 (正式写手)

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[求助] 细菌蛋白溶液如何快速除去DNA和RNA

大肠杆菌菌体用0.1的石英砂破壁后，如何用最简单的办法把溶液中的DNA和RNA（不求去除完全），但是不影响蛋白。（最好不用有机溶剂，以便后续操作）
另外，如果溶液加热至65℃，DNA变性能用离心去除吗？如果离心大概转速是多少？时间多少？

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秦皇汉武

1楼2013-07-14 23:32:07

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fushxmy

金虫 (正式写手)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-14 23:47:33
简单的办法是加DNase和RNase，这样可以完全消除核酸。如果你只是想把核酸打碎，可以试试超声。加热什么的不能去掉核酸，核酸是很耐热的，你只要看看PCR时的条件就知道了。热变性核酸也是可逆的。

我想把DNA从破菌液中去除，因为DNA的存在影响我后续的蛋白吸附，超声我试过了，破菌液开始很粘，超声后离心变清了，但是蛋白吸附后（疏水吸附），上maldi-tof后，谱峰并没有变好，我认为可能很多DNA吸附到我合成的材料的表面，而使蛋白无法附着到材料上。