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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光标记引物的PCR
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nancyliuand

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光标记引物的PCR


为什么引物带上荧光之后，PCR扩出来的目的条带就弱到看不见了。

相同体系、试剂、模板，就是换了一下引物，下游是普通引物，上游是新合成的带荧光标记的引物。
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1楼2013-07-07 17:29:48
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pk6126258

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这个很正常，普通引物带上荧光染料后理化性质会改变，我做的也是SSR 荧光标记引物， 一般荧光引物合成回来后也要做个温度梯度  最适温度会比你之前的温度要低个三四度
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2楼2013-11-04 11:03:09
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沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

估计温度不对。查看下引物2聚体或者用梯度摸下条件~
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应助之星就是我~没错。你没有看错~
3楼2013-11-04 13:03:31
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