| 查看: 1017 | 回复: 3 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
求助 几根色谱柱柱效突然降低 怀疑是否是仪器问题
|
|||
|
我已经无语了 注册了个账号问问看 用的是东曹G3000xl 硅胶基质的尺寸排阻柱子 7.8*3000mm 做分子筛（sec）检测蛋白质（柱子出厂保存液为0.1mol/l磷酸盐ph6.8+0.1MNa2SO4+0.05%叠氮钠，流速0.5-1.0，最大压力70bar----1029psi） 第一根色谱柱 使用半年 仪器为安捷伦1600 因为检测类别多所以用了一台别的部门淘汰的waters2795专门做sec 柱效逐步下降，2个月后发现柱效不行了，淘汰 方法未变（样品过滤0.45um，流动相为0.1mol/l磷酸盐ph7.0+0.2MNacl+0.05%叠氮钠+1%异丙醇，清洗程序为20%乙腈一个小时，0.05%叠氮钠半小时） 开始用第二根色谱柱 使用10天 约100个样。第十天第一个样品发觉不对，检测柱效突然降低到最初的百分之十几。压力几天来360psi逐步到450psi。查图谱，第10天第一个样品开始严重拖尾，从第5天开始blank（水）8分钟莫名其妙有个很小鼓包，所有样品都有。查说明书，将清洗改为0.5MNa2SO4 ph3.0（最低耐受2.0）2个小时（离子性吸附），20%乙腈 2小时（疏水性吸附），0.05叠氮钠一小时，无用。用8M尿素（最后清洗手段）清洗后用20%乙腈冲一天，检查，无用。半流速反冲，无用。压力一直未超标，柱效回不来。 拿出第一根色谱柱，用尿素冲洗，踏板数回升到原来50%，使用1天，进样完结清洗时堵塞。半流速反冲，压力降低到正常，正过来，一段时间后又堵，反过来20分钟后堵，如是几次放弃（发觉乙腈不干净，可能倾倒液体时将瓶口灰尘冲下）。 更换所有溶剂和溶剂瓶，购买了保护柱。上周一开始使用第三根，这个礼拜二第一个样品柱效又突然降低为最初的10%，从3W降到3千，压力未变。查图谱周一开始5min所有样品及blank出现小鼓包。今天同事将柱子换到安捷伦仪器测试，保护柱压力正常（非常小），色谱柱冲洗半小时后压力逐步上升，接近最大压力，放弃。 waters的仪器被别人淘汰原因是跑梯度洗脱的比例非常不准，我们就用来跑不用梯度的sec。 明天a b c d四个泵都接一下测试流量准确否。 大家看看有什么建议吧 |
回复此楼» 猜你喜欢
299求调剂
已经有5人回复
-
收复试调剂生
已经有3人回复
-
280求调剂
已经有7人回复
-
环境领域全国重点实验室招收博士1-2名
已经有5人回复
-
303求调剂
已经有6人回复
-
290求调剂
已经有10人回复
-
0703化学求调剂 总分331
已经有3人回复
-
一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂
已经有8人回复
-
0703化学调剂
已经有3人回复
-
材料，纺织，生物（0856、0710），化学招生啦
已经有9人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 新液相色谱柱的活化与测柱效
已经有7人回复
- 液相柱子柱效降低
已经有6人回复
- 液相色谱柱效下降的可能原因 泵出问题会影响柱效吗
已经有7人回复
- waters 的C18色谱柱反冲对柱子有影响么
已经有21人回复
- 色谱柱 C8 柱效降低 怎么办
已经有12人回复
- 关于气相色谱柱效评价方法的客观性和实用性，大家讨论一下
已经有34人回复
- 求助：关于辅料在HPLC中杂质峰很多，干扰多
已经有4人回复
- 色谱柱与流动相问题
已经有14人回复
- 色谱柱柱效降低应该如何补救呢？
已经有18人回复
- 求助：活性炭吸附柱如何装填？
已经有14人回复
- 【求助】色谱柱再生
已经有9人回复
- 【求助】新色谱柱怎么冲洗
已经有45人回复
- 【求助】液相色谱柱反冲后还能否使用？
已经有22人回复
- 【求助】液相色谱柱压升高及出峰时间延长问题
已经有18人回复
- 【求助】同品牌同型号的两根色谱柱在同一台仪器上峰面积能差很多吗
已经有21人回复
- 【求助】新液相色谱柱压力狂高！
已经有20人回复
- 【求助】色谱柱冲洗压力的问题
已经有11人回复
- 【求助】液相色谱柱压力问题-水比例与泵压呈反比
已经有10人回复
- 【求助】tsk-gel凝胶色谱柱装反了，怎么办？
已经有11人回复
- 【求助】请教色谱柱选择的问题
已经有17人回复
- 【资源】HPLC：色谱柱的使用与维护
已经有12人回复
- 【求助】C18色谱柱压力大
已经有14人回复
- 【求助】色谱柱接反了会有什么影响吗？
已经有18人回复
4楼2013-07-04 22:59:41
wangkaibo123
荣誉版主 (职业作家)
kerry
-
专家经验: +726 - PhEPI: 3
- 应助: 1928 (讲师)
- 贵宾: 0.598
- 金币: 7869.1
- 散金: 10156
- 红花: 100
- 帖子: 3780
- 在线: 1007.1小时
- 虫号: 2088618
- 注册: 2012-10-26
- 性别: GG
- 专业: 抗肿瘤药物药理
- 管辖: 药学
2楼2013-07-04 22:40:15
3楼2013-07-04 22:49:58
