24小时热门版块排行榜    

查看: 2647  |  回复: 12

janelss

铁虫 (初入文坛)

[求助] 强阴离子交换柱,流穿问题

我的目标蛋白质PI是7.0 用强阴离子交换柱,缓冲液PH=8.5, 无论怎么做,目标蛋白质总是出现在流穿中,操作,溶液什么的都没有问题,这是为什么。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
janelss: 金币+10 2013-06-21 09:10:13
强阴离子不是指结合能力强,指的是结合范围宽泛。你可以采用降低上样离子强度的方法来解决这个问题。不过,即然你的样品的pI是7.0,缓冲液调8.5,完全可以用弱阴做,这样可以最大程度的去除杂质。多试试
8楼2013-06-19 15:33:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
janelss: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-06-21 09:10:02
上样盐浓度多少?PI是综合的所有氨基酸的计算值,实际过离子交换的时候只于蛋白质表面的氨基酸相互作用,PI仅供参考。用几种树脂,多个条件孵育,看看和什么条件能结合。祝顺利。
2楼2013-06-17 09:53:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dengyuxq

金虫 (小有名气)

是不是溶液里面杂蛋白较多或者色素很深,我们也遇到过,因为色素太深了就挂不上柱子,先使用疏水或者其他柱子除去一部分杂蛋白和色素之后就能挂上了!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2013-06-18 16:50:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

你怎么知道你的蛋白质的等电点?
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2013-06-19 04:10:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

janelss

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by dengyuxq at 2013-06-18 16:50:25
是不是溶液里面杂蛋白较多或者色素很深,我们也遇到过,因为色素太深了就挂不上柱子,先使用疏水或者其他柱子除去一部分杂蛋白和色素之后就能挂上了!

哦,应该是因为色素物质太多的缘故,再问下有哪些方法能除色素,顺便提一下,我的目标物质是血红素蛋白质,也算一种色素物质吧。
5楼2013-06-19 08:43:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
哥们,你为什么要用强离子的呢?强的本来就结合能力强,不是特别好洗下来的。
6楼2013-06-19 08:53:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greety0918

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
janelss: 金币+10 2013-06-21 09:10:29
对啊,为什么要用强阴的啊,很容易变性的,可以尝试适当提高pH到9,另外你的缓冲液是不是离子强度太高了,还是有洗脱盐

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

终于硕士毕业了,解放ing
7楼2013-06-19 15:28:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

janelss

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by greety0918 at 2013-06-19 15:28:20
对啊,为什么要用强阴的啊,很容易变性的,可以尝试适当提高pH到9,另外你的缓冲液是不是离子强度太高了,还是有洗脱盐

呵呵 好像是上样时有点离子浓度。
9楼2013-06-19 18:02:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Stefanie旭

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我是来学习一下滴,接下来我打算用弱碱性阴离子交换树脂,吸附霉菌分泌的抑菌物质。。。但确实,有资料说强酸或强碱的离子交换树脂,第一很难洗脱下来,第二,容易使样品变性。。甚至还要注意树脂本身的损坏。。。慎重选择吸附目标噢
我们都是宇宙中独一无二的个体,真正意识到这一点,那自卑便从人世间消失了
10楼2013-06-20 10:14:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 janelss 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 广西大学材料导师推荐 +3 夏夏夏小正 2026-03-17 5/250 2026-03-21 22:20 by 金昊ML
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +14 chaojifeixia 2026-03-19 15/750 2026-03-21 13:24 by zhukairuo
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +8 .6lL 2026-03-18 8/400 2026-03-21 00:58 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 5/250 2026-03-20 22:11 by 云游重阳
[考研] 材料与化工专硕调剂 +7 heming3743 2026-03-16 7/350 2026-03-20 19:31 by zhukairuo
[考研] 环境工程调剂 +9 大可digkids 2026-03-16 9/450 2026-03-20 17:38 by 醉在风里
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +7 困于星晨 2026-03-17 9/450 2026-03-20 17:38 by 无懈可击111
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
信息提示
请填处理意见