应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 强阴离子交换柱，流穿问题
131/2返回列表12下一页
查看: 2645  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

janelss

铁虫 (初入文坛)

[求助] 强阴离子交换柱，流穿问题

我的目标蛋白质PI是7.0 用强阴离子交换柱，缓冲液PH=8.5， 无论怎么做，目标蛋白质总是出现在流穿中，操作，溶液什么的都没有问题，这是为什么。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-17 09:31:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
janelss: 金币+10 2013-06-21 09:10:13
强阴离子不是指结合能力强，指的是结合范围宽泛。你可以采用降低上样离子强度的方法来解决这个问题。不过，即然你的样品的pI是7.0，缓冲液调8.5，完全可以用弱阴做，这样可以最大程度的去除杂质。多试试
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2013-06-19 15:33:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
janelss: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-06-21 09:10:02
上样盐浓度多少？PI是综合的所有氨基酸的计算值，实际过离子交换的时候只于蛋白质表面的氨基酸相互作用，PI仅供参考。用几种树脂，多个条件孵育，看看和什么条件能结合。祝顺利。
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-17 09:53:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dengyuxq

金虫 (小有名气)
是不是溶液里面杂蛋白较多或者色素很深，我们也遇到过，因为色素太深了就挂不上柱子，先使用疏水或者其他柱子除去一部分杂蛋白和色素之后就能挂上了！
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

janelss
3楼2013-06-18 16:50:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
你怎么知道你的蛋白质的等电点？
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2013-06-19 04:10:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

janelss

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by dengyuxq at 2013-06-18 16:50:25
是不是溶液里面杂蛋白较多或者色素很深，我们也遇到过，因为色素太深了就挂不上柱子，先使用疏水或者其他柱子除去一部分杂蛋白和色素之后就能挂上了！

哦，应该是因为色素物质太多的缘故，再问下有哪些方法能除色素，顺便提一下，我的目标物质是血红素蛋白质，也算一种色素物质吧。
赞一下 回复此楼
5楼2013-06-19 08:43:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ericyo918

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
哥们，你为什么要用强离子的呢？强的本来就结合能力强，不是特别好洗下来的。
赞一下 回复此楼
6楼2013-06-19 08:53:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greety0918

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
janelss: 金币+10 2013-06-21 09:10:29
对啊,为什么要用强阴的啊,很容易变性的,可以尝试适当提高pH到9,另外你的缓冲液是不是离子强度太高了,还是有洗脱盐
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

janelss
终于硕士毕业了,解放ing
7楼2013-06-19 15:28:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

janelss

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by greety0918 at 2013-06-19 15:28:20
对啊,为什么要用强阴的啊,很容易变性的,可以尝试适当提高pH到9,另外你的缓冲液是不是离子强度太高了,还是有洗脱盐

呵呵 好像是上样时有点离子浓度。
赞一下 回复此楼
9楼2013-06-19 18:02:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Stefanie旭

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我是来学习一下滴，接下来我打算用弱碱性阴离子交换树脂，吸附霉菌分泌的抑菌物质。。。但确实，有资料说强酸或强碱的离子交换树脂，第一很难洗脱下来，第二，容易使样品变性。。甚至还要注意树脂本身的损坏。。。慎重选择吸附目标噢
赞一下 回复此楼
我们都是宇宙中独一无二的个体，真正意识到这一点，那自卑便从人世间消失了
10楼2013-06-20 10:14:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 janelss 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0805 316求调剂 +3 大雪深藏 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:55 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-18 3/150 2026-03-21 17:31 by ColorlessPI
[考研] 298求调剂 +4 上岸6666@ 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:14 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 22 350 本科985求调剂，求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 材料学学硕080502 337求调剂-一志愿华中科技大学 +4 顺顺顺mr 2026-03-18 5/250 2026-03-21 10:22 by luoyongfeng
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:38 by 学员8dgXkO
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 机械专硕325，寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭