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janelss

铁虫 (初入文坛)

[求助] 强阴离子交换柱,流穿问题

我的目标蛋白质PI是7.0 用强阴离子交换柱,缓冲液PH=8.5, 无论怎么做,目标蛋白质总是出现在流穿中,操作,溶液什么的都没有问题,这是为什么。
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janelss

铁虫 (初入文坛)

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3楼: Originally posted by dengyuxq at 2013-06-18 16:50:25
是不是溶液里面杂蛋白较多或者色素很深,我们也遇到过,因为色素太深了就挂不上柱子,先使用疏水或者其他柱子除去一部分杂蛋白和色素之后就能挂上了!

哦,应该是因为色素物质太多的缘故,再问下有哪些方法能除色素,顺便提一下,我的目标物质是血红素蛋白质,也算一种色素物质吧。
5楼2013-06-19 08:43:53
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janelss

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
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7楼: Originally posted by greety0918 at 2013-06-19 15:28:20
对啊,为什么要用强阴的啊,很容易变性的,可以尝试适当提高pH到9,另外你的缓冲液是不是离子强度太高了,还是有洗脱盐

呵呵 好像是上样时有点离子浓度。
9楼2013-06-19 18:02:36
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