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shiliyusly

新虫 (小有名气)

[求助] 3'RACE结果求教

大家好,本人第一次做RACE,做出来的结果不知道可不可以用,所以麻烦高手能指点下,不胜感激啊!
下图是PCR结果
这是我做一个基因的3'race,左边是用outer引物PCR产物,摸索3个退火温度;右边是用左边的第一个退火温度PCR产物作为模板进行的inner引物PCR反应,摸索4个退火温度。目的片段大小为900bp左右。
我现在不知道我这个结果可不可以用,是还要进行一些优化吗?
是否需要割胶纯化呢?我想直接拿PCR产物让公司纯化测序,不知道可不可行。不知道这2种哪种效果更好些
3'RACE结果求教
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
shiliyusly: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-06-13 12:07:06
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-13 19:29:04
只要有目的条带就可以试试往下做。PCR产物最好是切胶纯化后再送测序。如果测序效果不好,可以克隆到载体里挑单克隆再测序。
2楼2013-06-13 10:55:34
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shiliyusly

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-13 10:55:34
只要有目的条带就可以试试往下做。PCR产物最好是切胶纯化后再送测序。如果测序效果不好,可以克隆到载体里挑单克隆再测序。

谢谢你!
3楼2013-06-13 12:07:25
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