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凯哥要加油

银虫 (小有名气)

[求助] 关于分子吸光系数和吸光值求浓度的问题,急急急

给出一个分子吸光系数,单位是L/(mol·cm)。另外知道吸光值。怎么计算浓度啊。比如:使用分子吸光系数22000L/(mol·cm)计算羰基含量(nmol/mg MPI)。(一篇文献中的)取的是取1mL质量浓度为2mg/mL的蛋白溶液。吸光值比如说是0.5.怎么计算含量啊?
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等待最痛苦
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凯哥要加油

银虫 (小有名气)

晕。。。突然明白了。。。
等待最痛苦
2楼2013-06-04 22:50:21
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志子

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
凯哥要加油: 金币+5, 有帮助, 虽然你没有回答我大部分问题,好在我已经明白计算过程了。还是谢谢您。 2013-06-05 15:20:58
以蛋白标准溶液浓度(可购买,标准物质稍昂贵)为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
计算出回归方程 Y=aX+b
把待测样品的吸光值代入回归方程,算出待测样品浓度。

根据比尔定律,吸光度A与吸光物质的浓度c和吸收池光程长b的乘积成正比。当c的单位为g/L,b的单位为cm时,则 A = abc,比例系数a称为吸收系数,单位为L/g.cm;当c的单位为mol/L,b的单位为cm时,则 A = εbc,比例系数ε称为摩尔吸收系数,单位为L/mol.cm,数值上ε等于a与吸光物质的摩尔质量的乘积。它的物理意义是:当吸光物质的浓度为1 mol/L,吸收池厚为1cm,以一定波长的光通过时,所引起的吸光度值A。ε值取决于入射光的波长和吸光物质的吸光特性,亦受溶剂和温度的影响。显然,显色反应产物的ε值愈大,基于该显色反应的光度测定法的灵敏度就愈高。
摩尔吸收系数=百分吸收系数*M/10=100*100/10=1000
3楼2013-06-04 22:54:21
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志子

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 志子 at 2013-06-04 22:54:21
以蛋白标准溶液浓度(可购买,标准物质稍昂贵)为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
计算出回归方程 Y=aX+b
把待测样品的吸光值代入回归方程,算出待测样品浓度。

根据比尔定律,吸光度A与吸光物质的浓 ...

答案仅代表个人疏学,无权威性,有误恳请指正。
4楼2013-06-04 22:55:29
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夏爱熙7998

新虫 (初入文坛)


感谢参与,应助指数 +1
sweety: 金币+1, 应助指数-1, 鼓励新虫参与,但为非应助回答 2013-06-22 14:20:32
没有遇到这样的问题,但是经常做吸光度试验,所以就关注了本帖,学到知识了!
5楼2013-06-05 08:28:15
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zhoupeng87

版主 (文学泰斗)

优秀版主优秀版主

感谢参与,应助指数 +1
sweety: 应助指数-1, 非有效应助 2013-06-22 14:22:08
他这个一般都是要做几个标样,搞出来个标准曲线之后算的
6楼2013-06-05 10:41:23
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a皑雪c

银虫 (正式写手)

楼主,我现在也在测羰基   我想问的是最后一步用到的PH2.3的盐酸胍磷酸盐缓冲液怎么配的?   还有计算的话要知道最后体积,这个体积怎么测,不是把1.5ml离心管里的液体直接加到比色皿里面吗,那怎么知道体积呢,能否告知        请问样品怎么处理的,文献中处理肉是直接把肉在磷酸盐缓冲液中均质,再取一点做后续测定  但是肯定会有很多颗粒取不到,你是做什么样品的


非常感谢
7楼2013-06-06 19:41:20
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凯哥要加油

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 志子 at 2013-06-04 22:55:29
答案仅代表个人疏学,无权威性,有误恳请指正。...

对不起您说的跟我问的不是一个问题
等待最痛苦
8楼2013-06-18 14:34:07
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凯哥要加油

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by a皑雪c at 2013-06-06 19:41:20
楼主,我现在也在测羰基   我想问的是最后一步用到的PH2.3的盐酸胍磷酸盐缓冲液怎么配的?   还有计算的话要知道最后体积,这个体积怎么测,不是把1.5ml离心管里的液体直接加到比色皿里面吗,那怎么知道体积呢,能否 ...

我做鱼类的,我们测出来的是浓度。与体积关系不大。盐酸胍配置的时候用你提取蛋白的溶液配置。体积最后的换算跟最终取的体积有关。
等待最痛苦
9楼2013-06-18 14:36:01
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凯哥要加油

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by zhoupeng87 at 2013-06-05 10:41:23
他这个一般都是要做几个标样,搞出来个标准曲线之后算的

这里不存在标准曲线问题
等待最痛苦
10楼2013-06-18 14:36:21
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